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Development of an evaluation method for chemical toxicity of long-term cultured neurons using Raman spectroscopy

Research Project

Project/Area Number 21K18047
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 90110:Biomedical engineering-related
Research InstitutionKwansei Gakuin University

Principal Investigator

Hashimoto Kosuke  関西学院大学, 生命環境学部, 助教 (30868831)

Project Period (FY) 2021-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywordsラマン分光法 / 神経細胞 / ビスフェノールA / 発達神経毒生 / ケモメトリックス / 薬剤感受性 / 神経発達毒性
Outline of Research at the Start

本研究は化学物質が神経細胞の発達へおよぼす影響を評価する新技術の開発を目指している.まず,神経細胞の分子ダイナミクスと活動電位ダイナミクスを同時に追跡可能なラマン顕微鏡を構築する.次に,神経細胞を培養100日以上の長期間にわたり活動電位測定とラマン測定し,活動電位ダイナミクスと関連したラマンスペクトル変化を抽出する. そして,内分泌かく乱物質ビスフェノール Aを曝露した神経細胞のラマンスペクトルを測定し,作成した評価モデルの精度を検証する.

Outline of Final Research Achievements

In the present study, we examined the relation between the developmental stage of neuron and susceptibility to bisphenol A (BPA). BPA was added to the neurons on days 15, 30 and 60 of culture. Raman spectra were obtained from the live neurons every hour up to 5 hours after addition of BPA. The collected spectra were analyzed by principal component analysis. The spectral change was observed during the BPA treatment in the datasets of 15 and 30 days of culture, and the spectral changes could be attributed to tyrosine. In contrast, no spectral changes were observed in the dataset of 60 days of culture.
It is suggested that the neurodevelopmental toxicity due to BPA is a gradual and long-lasting excitotoxicic effect on the neurons in the immature developmental stages.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究によって得られた大きな発見の一つは,神経細胞のBPAに対する応答が培養日数によって異なることであった.成熟した神経細胞ではBPA曝露によるラマンスペクトルに変化がみられなかったのに対し,未成熟な神経細胞ではBPA曝露によってラマンスペクトルの変化が観測された.本研究成果は,ラマン分光法が化学物質が神経細胞へもたらす影響を生きたまま評価できることを示している.また神経細胞を長期間培養しながら測定し続けることのできる光学系を確立することに成功し,BPAのような内分泌かく乱物質の他,マイクロプラスチックやウイルスの毒性評価に応用することができるようになった.

Report

(4 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (13 results)

All 2023 2022 2021

All Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (10 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] ラマン分光法による化学物質の発達神経毒性モニタリング技術の開発2022

    • Author(s)
      橋本剛佑,佐藤奨悟,森山美優,佐藤英俊
    • Journal Title

      レーザー学会第566回研究会報告書

      Volume: RTM-22-15-25 Pages: 11-16

    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Journal Article] Attenuated Total Reflection Far-Ultraviolet (ATR-FUV) Spectroscopy is a Sensitive Tool for Investigation of Protein Adsorption2022

    • Author(s)
      Hashimoto Kosuke、Morisawa Yusuke、Tortora Mariagrazia、Rossi Barbara、Ozaki Yukihiro、Sato Hidetoshi
    • Journal Title

      Applied Spectroscopy

      Volume: - Issue: 7 Pages: 793-800

    • DOI

      10.1177/00037028211070835

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] ラマン分光法と多変量解析で視る神経細胞の分化と機能2021

    • Author(s)
      橋本 剛佑,佐藤 英俊
    • Journal Title

      月刊OPTRONICS

      Volume: 40(8) Pages: 95-99

    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] A study on electronic structure and transition of saccharides by ATR-FUV and UVRR spectroscopy2023

    • Author(s)
      Kosuke Hashimoto,Fatima Matroodi, Mariagrazia Tortora, Yusuke Morisawa,Yukihiro Ozaki,Barbara Rossi,Hidetoshi Sato
    • Organizer
      SciX2023
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] A study on relationship between development of neuronal cells and susceptibility to bisphenol A (BPA) using Raman spectroscopy2023

    • Author(s)
      Kosuke HASHIMOTO, Shogo SATO, and Hidetoshi SATO
    • Organizer
      SciX2023
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 遠紫外分光法とUV共鳴ラマン分光法による単糖の電子構造の研究2023

    • Author(s)
      橋本剛佑,Fatima Matroodi, 森澤勇介,尾崎幸洋,Barbara Rossi,佐藤英俊
    • Organizer
      レーザー学会第577回研究会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] ラマン分光法を用いた化学物質の神経発達毒性評価法の開発2023

    • Author(s)
      橋本 剛佑,佐藤 奨悟,森山 美優,岩崎 啓太,佐藤 英俊
    • Organizer
      レーザー学会学術講演会第43回年次大会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] ラマン分光法による化学物質の発達神経毒性モニタリング技術の開発2022

    • Author(s)
      橋本剛佑,佐藤奨悟,森山美優,佐藤英俊
    • Organizer
      レーザー学会第566回研究会「光・レーザーの医学・生物学応用」
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 顕微ラマン分光法を用いた化学物質の発達神経毒性評価法の開発2022

    • Author(s)
      橋本剛佑,佐藤英俊
    • Organizer
      レーザ顕微鏡研究会第47回講演会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] ラマン分光法を用いた神経細胞のビスフェノールAへの感受性の分析2022

    • Author(s)
      佐藤奨悟,橋本剛佑,佐藤英俊
    • Organizer
      レーザー学会第42回年次大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 顕微ラマン分光法で観察する神経細胞の発達過程2021

    • Author(s)
      橋本剛佑,佐藤英俊
    • Organizer
      第6回フォトニクスワークショップ
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] A study on development of living neuron with bisphenol A using Raman spectroscopy2021

    • Author(s)
      Kosuke Hashimoto, Hidetoshi Sato
    • Organizer
      Pacifichem2021
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Study on ATR-FUV spectroscopy for investigation of electronic structure and transitions of proteins2021

    • Author(s)
      Kosuke Hashimoto, Yusuke Morisawa, Mariagrazia Tortora, Barbara Rossi, Yukihiro Ozaki, Hidetoshi Sato
    • Organizer
      Pacifichem2021
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Int'l Joint Research

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Published: 2021-04-28   Modified: 2025-01-30  

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