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Development of novel genome editing technology using pearl millet frozen pollen

Research Project

Project/Area Number 21K19115
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 39:Agricultural and environmental biology and related fields
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

Yoshida Kentaro  京都大学, 農学研究科, 教授 (40570750)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 石井 孝佳  鳥取大学, 乾燥地研究センター, 准教授 (80823880)
Project Period (FY) 2021-07-09 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Keywordsパールミレット / 染色体脱落 / ゲノム編集 / 倍加半数体 / コムギ / 形質転換 / 花粉 / 植物培養 / 亜科間交雑 / 属間交雑
Outline of Research at the Start

本研究は、パールミレットとコムギとの亜種間交雑による倍加半数体技術とゲノム編集技術を融合することで、形質転換体の作出が困難なコムギにおいてもゲノム編集を可能にする新しい技術を開発するのが目的である。パールミレット花粉にRNPを発現させ、パールミレットの精細胞をRNPのキャリアーとして使い、受精時にコムギの標的ゲノム領域を編集する。本技術は、キメラフリー、外来遺伝子フリーのゲノム編集コムギを作出できるだけでなく、乾燥に強く、冷凍保存できるパールミレット花粉の特徴を生かし、花粉を利用したゲノム編集試薬の創出が期待される。

Outline of Final Research Achievements

In this study, we aimed to develop a novel genome editing method for wheat by exploiting the phenomenon of chromosome elimination through hybridization with frost-tolerant pearl millet pollen and embryo of wheat. We established optimal media and conditions for efficiently obtaining calli from mature pearl millet seeds. We also identified the conditions and media necessary for regeneration from calli, contributing to tissue culture in pearl millet. Furthermore, pearl millet transformation was achieved using in planta particle bombardment. This method allows for obtaining pearl millet pollen carrying gRNA and Cas9 protein necessary for genome editing of wheat.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

パールミレットの完熟種子からの脱分化、再分化可能な良質なカルスを獲得するのに必要な培養条件、カルスからの再分化の条件について新たな知見が本研究によって得られた。また、iPB法によるパールミレットの形質転換技術を確立することができた。これらの技術的な成果は、気候変動による乾燥地域及び高温地域の拡大から、発達した根圏をもち、作物の中でも優れた耐乾燥性と耐暑性を持つパールミレットの組織培養の発展並びに難形質転換パールミレットのゲノム編集技術へと道を開くものである。

Report

(4 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2023 2022 2021

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (6 results)

  • [Journal Article] Development and regeneration of wheat-rice hybrid zygotes produced by in vitro fertilization system2021

    • Author(s)
      Maryenti Tety、Ishii Takayoshi、Okamoto Takashi
    • Journal Title

      New Phytologist

      Volume: 232 Issue: 6 Pages: 2369-2383

    • DOI

      10.1111/nph.17747

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] パールミレット完熟種子を用いたアグロバクテリウム形質転換法の構築2023

    • Author(s)
      青木亮磨・石井孝佳・吉田健太郎
    • Organizer
      日本育種学会第144回講演会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] パールミレット完熟種子を用いたアグロバクテリウム形質転換法の開発2023

    • Author(s)
      青木亮磨・石井孝佳・吉田健太郎
    • Organizer
      第18回ムギ類研究会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] Establishment of an in-Planta Particle Bombardment Gene Editing method in Pearl Millet.2023

    • Author(s)
      Arikpo G., Ishii T.
    • Organizer
      第15回中国地区育種談話会
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] Establishment of easy gene editing protocol in cowpea and pearl millet2022

    • Author(s)
      Arikpo, G., Ubi, B., and Ishii, T.
    • Organizer
      第14回 中国地区育種談話会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] コムギ育種への利用に向けたパールミレットの形質転換系の構築2022

    • Author(s)
      青木亮磨・石井孝佳・吉田健太郎
    • Organizer
      第17回 ムギ類研究会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 亜科間交雑で発生する染色体脱落を利用したコムギゲノム編集技術の確立2021

    • Author(s)
      青木亮磨、石井孝佳、松岡由浩、吉田健太郎
    • Organizer
      第16回ムギ類研究会
    • Related Report
      2021 Research-status Report

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Published: 2021-07-13   Modified: 2025-01-30  

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