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Development of new probes for visualization of subcellular distribution of lipids

Research Project

Project/Area Number 21K19231
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 43:Biology at molecular to cellular levels, and related fields
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

Ikenouchi Junichi  九州大学, 理学研究院, 教授 (10500051)

Project Period (FY) 2021-07-09 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Keywords膜流動性 / スフィンゴミエリン / コレステロール / 生体膜 / ラフト / 可視化 / リン脂質 / 膜ドメイン
Outline of Research at the Start

細胞膜の構成要素であるリン脂質には多数の分子種が存在しますが、それらの局在や機能は不明な点が多くあります。特定の脂質分子の局在を可視化する上で、特定の脂質に特異的に結合する脂質結合タンパク質が有用ですが、天然に存在する脂質結合タンパク質の種類は限られています。本研究では、既存の脂質結合タンパク質を改変することにより、可視化できる脂質のレパートリーを拡張し、特定の脂質分子種の機能や各種の病態発症との関連を明らかにします。

Outline of Final Research Achievements

Biological membranes are composed of diverse lipid molecular species, and the spatiotemporal heterogeneous distribution of these lipid species is thought to be responsible for diverse intracellular functions. In this research project, I aimed to develop tools to visualise such diversity of plasma membrane lipids and the physical properties of plasma membranes formed as admixtures of diverse lipid species. Pyrene is a solvatochromic dye and allows visualisation of the order of the membrane. However, pyrene backbone dyes are highly membrane permeable, so the signal at the plasma membrane is relatively low. In this project, I developed a probe to visualise the heterogeneity of plasma membrane properties by modifying the fluorescent solvatochromic dye of the pyrene dye and selectively localising it to the plasma membrane.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

生体膜は多様な脂質分子種によって構成されており、これらの脂質種が時空間的に不均一に分布することが、多様な細胞内機能に関わると考えられている。人工脂質二重膜において、スフィンゴ脂質やコレステロールは、秩序性の高い膜領域を形成し、他の膜領域と相分離する性質を示すが、生細胞の形質膜の物性が不均一であるかについては、解析手法が限られるため未解明である。本研究では、周囲の膜の物性に依存して異なる波長の蛍光を発する環境依存性プローブを改変し、生体膜の不均一性の可視化するプローブの開発を行った。

Report

(3 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (16 results)

All 2023 2022 2021 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 2 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 5 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] Cholesterol-rich domain formation mediated by ZO proteins is essential for tight junction formation2023

    • Author(s)
      Shigetomi Kenta、Ono Yumiko、Matsuzawa Kenji、Ikenouchi Junichi
    • Journal Title

      Proceedings of the National Academy of Sciences

      Volume: 120 Issue: 8

    • DOI

      10.1073/pnas.2217561120

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Tricellulin secures the epithelial barrier at tricellular junctions by interacting with actomyosin2022

    • Author(s)
      Cho Yuma、Haraguchi Daichi、Shigetomi Kenta、Matsuzawa Kenji、Uchida Seiichi、Ikenouchi Junichi
    • Journal Title

      Journal of Cell Biology

      Volume: 221 Issue: 4

    • DOI

      10.1083/jcb.202009037

    • Related Report
      2022 Annual Research Report 2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] mTORC2 suppresses cell death induced by hypo-osmotic stress by promoting sphingomyelin transport2022

    • Author(s)
      Ono Yumiko、Matsuzawa Kenji、Ikenouchi Junichi
    • Journal Title

      Journal of Cell Biology

      Volume: 221 Issue: 4

    • DOI

      10.1083/jcb.202106160

    • Related Report
      2022 Annual Research Report 2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 上皮細胞におけるスフィンゴミエリンの輸送に関わる分子機構の解析2022

    • Author(s)
      池ノ内 順一
    • Organizer
      生理学研究所上皮研究会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Roles of membrane lipids in the organization of cell-cell adhestion structure.2022

    • Author(s)
      Junichi Ikenouchi
    • Organizer
      第60回日本生物物理学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] 細胞膜構造形成における脂質の機能解析2022

    • Author(s)
      池ノ内 順一
    • Organizer
      第20回 医用分光学研究会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] mTORC2はスフィンゴミエリン輸送を促進することにより、低浸透圧ストレスによる細胞死を抑制する2022

    • Author(s)
      小野由美子、松沢健司、池ノ内順一
    • Organizer
      第45回日本分子生物学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] ブレブの動的な振る舞いを制御する分子機構2021

    • Author(s)
      池ノ内 順一、青木 佳南
    • Organizer
      第73回日本細胞生物学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 上皮細胞シートにおける Tricellulin による三細胞間接着の形成機構2021

    • Author(s)
      長 佑磨、池ノ内 順一
    • Organizer
      第73回日本細胞生物学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] MAGI-ASPP を介した細胞の収縮力調節による上皮細胞シートの恒常性維持機構2021

    • Author(s)
      松沢 健司、池ノ内 順一
    • Organizer
      第73回日本細胞生物学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] タイトジャンクション領域における細胞膜脂質の集積機構2021

    • Author(s)
      重富 健太、池ノ内 順一
    • Organizer
      第73回日本細胞生物学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 上皮細胞において mTORC2経路はアピカル膜へのスフィンゴミエリンの輸送を促進することで低浸透圧による細胞死を 抑制する2021

    • Author(s)
      小野 由美子、池ノ内 順一
    • Organizer
      第73回日本細胞生物学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] Roles of membrane lipids in tight junction formation2021

    • Author(s)
      Junichi Ikenouchi
    • Organizer
      4th International TJ Conference 2021
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Roles of membrane lipids in tight junction formation2021

    • Author(s)
      Junichi Ikenouchi
    • Organizer
      第51回 生理研国際シンポジウム Frontiers in Epithelial Cell Biology
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Remarks] 九州大学理学部生物学科代謝生理学研究室ホームページ

    • URL

      http://www.biology.kyushu-u.ac.jp/~taisha/

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Remarks] 研究室のHP

    • URL

      http://www.biology.kyushu-u.ac.jp/~taisha/

    • Related Report
      2021 Research-status Report

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Published: 2021-07-13   Modified: 2024-01-30  

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