| Project/Area Number |
21K20783
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
0803:Pathology, infection/immunology, and related fields
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| Research Institution | Azabu University |
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Principal Investigator |
小山 雄一 麻布大学, 生命・環境科学部, 助教 (70907998)
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| Project Period (FY) |
2021-08-30 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | 免疫チェックポイント分子 / NK細胞 / 尿路上皮癌 / オートファジー / 腫瘍微小環境 / B7-H3 |
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| Outline of Research at the Start |
免疫チェックポイント阻害薬の効果には腫瘍局所における免疫活性が必要である。癌細胞が様々な機序で免疫を抑制するため、免疫チェックポイント阻害薬のみでは十分な効果が得られない。近年、癌免疫抑制の機序として、癌細胞におけるオートファジーを介した免疫調整が注目されている。そのため、オートファジーの制御による免疫増強を介した免疫チェックポイント阻害薬の効果向上が期待される。
本研究では、免疫チェックポイント分子のB7-H3とオートファジーの共制御が癌免疫に及ぼす影響について尿路上皮癌細胞株を用いて解析する。これにより、B7-H3とオートファジーの両者を標的とした尿路上皮癌の新規治療法の確立が期待される。
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| Outline of Annual Research Achievements |
当該年度に得られた実験結果は次の通り（①～⑤）である。①抗B7-H3抗体存在下におけるマウス脾内白血球による尿路上皮癌細胞株の傷害率を解析した。抗B7-H3抗体の添加による明らかな細胞傷害率の変化はみられなかった。②尿路上皮癌細胞株におけるPD-L1発現をフローサイトメトリーで確認した後、抗PD-L1抗体存在下におけるマウス脾内白血球による尿路上皮癌細胞の傷害率を解析した。抗PD-L1抗体添加による明らかな細胞傷害率の変化はみられなかった。③マウス脾内細胞を用いた実験では免疫チェックポイント抗体添加による細胞傷害率の増強がみられなかったため、マウス脾臓よりNK細胞を磁気分離して実験に用いることを計画した。マウス脾臓から磁器分離した細胞をIL-2存在下で培養し、抗CD3抗体および抗CD49b抗体を用いてNK細胞の割合をフローサイトメトリーで解析したところ、8割程度のCD3陰性・CD49b陽性細胞がみられた。④マウス脾内白血球と磁気分離したNK細胞を用いて細胞傷害率を比較した。脾内白血球群と比較し、NK細胞群では2.5倍程度高い細胞傷害率を示した。⑤各種免疫チェックポイント抗体がNK細胞による尿路上皮癌細胞の傷害に及ぼす影響について解析した。抗PD-L1抗体、抗B7-H3抗体、抗NKG2A抗体、抗CD96抗体、抗PD-1抗体を用いて検討したが、いずれの抗体も細胞傷害率に明らかな変化を及ぼさなかった。
現在、NK細胞による細胞傷害率を増強させるための各種条件について検討を重ねている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
細胞傷害率を増強させるための至適条件設定に時間を要し、計画の修正が生じたため。また、機器の不具合により解析が一時滞ったことも一部影響している。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度までにいくつかの基礎的な実験結果が得られたが、癌免疫活性を増強させるための条件検討をさらに重ねていく必要性がある。現在、尿路上皮癌細胞株を刺激して免疫チェックポイント分子の発現を高めてから実験系に利用する方法を検討している。免疫チェックポイント抗体によりNK細胞による癌細胞傷害が増強することについての論文が報告されているため、関連文献を参考に条件の詳細を決定していく。
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