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Noninvasive identification of cultured stratified squamous epithelial stem cells for regenerative medicine focusing adult stem cell plasticity

Research Project

Project/Area Number 21KK0198
Research Category

Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 90:Biomedical engineering and related fields
Research InstitutionTottori University (2023)
The University of Tokyo (2021-2022)

Principal Investigator

難波 大輔  鳥取大学, 医学部, 教授 (10380255)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 古徳 純一  帝京大学, 医療技術学部, 教授 (70450195)
早水 桃子  早稲田大学, 理工学術院, 准教授 (00785727)
Project Period (FY) 2021-10-07 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥18,720,000 (Direct Cost: ¥14,400,000、Indirect Cost: ¥4,320,000)
Fiscal Year 2023: ¥7,280,000 (Direct Cost: ¥5,600,000、Indirect Cost: ¥1,680,000)
Fiscal Year 2022: ¥7,670,000 (Direct Cost: ¥5,900,000、Indirect Cost: ¥1,770,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000)
Keywords上皮幹細胞 / 表皮角化幹細胞
Outline of Research at the Start

申請者らは、深層学習を用いた画像認識と状態空間モデルによる物体追跡アルゴリズムを組み合わせることで、DeepACTと呼ばれる新しい自動細胞追跡システムと培養ヒト幹細胞の品質管理法の開発に成功した。本研究課題は、この技術を海外共同研究者が確立した他のヒト重層扁平上皮幹細胞培養系に応用し、高い可塑性を持つ重層扁平上皮を用いた、新しい再生医療のための基盤技術を創出するものである。

Outline of Annual Research Achievements

培養ヒト幹細胞を用いた再生医療の普及や産業化のためには、培養幹細胞の品質管理法の開発が喫緊の課題である。申請者らは、深層学習を用いた画像認識と状態空間モデルによる物体追跡アルゴリズムを組み合わせることで、DeepACTと呼ばれる新しい自動細胞追跡システムの開発に成功し、位相差顕微鏡によるタイムラプス画像の細胞動態解析から培養中のヒト表皮幹細胞を非侵襲的に同定することに成功した。この方法は、幹細胞培養管理のデジタル・トランスフォーメーション(DX)に基づいた新しい再生医療用培養幹細胞の品質管理法として期待される。海外共同研究先は、表皮だけでなく、様々な種類のヒト重層扁平上皮幹細胞培養系を確立し、これら幹細胞の可塑性を利用して再生医療に応用しようとしている。本研究課題は、申請者らが開発したこの技術を、海外共同研究者が確立した他のヒト重層扁平上皮幹細胞培養系に応用し本技術の汎用性を向上させ、重層扁平上皮幹細胞を非侵襲的に同定する方法を確立する。重層扁平上皮幹細胞は、高い可塑性を持ち、他の重層扁平上皮を互いに再生することができることから、本研究は、幹細胞培養管理のDXを推進する若手研究者を育成しつつ、患者の状態に合わせて、最適な幹細胞ソースを選択する、新しい再生医療のための基盤技術を創出するものである。
令和5年度には、ヒト表皮角化幹細胞の動態解析を行い、細胞外環境の一つである温度が、幹細胞動態を制御することを見出し、論文を発表することが出来た。現在、他の組織幹細胞においても温度が幹細胞動態を制御するのか、さらに温度による幹細胞動態が培養幹細胞品質に与える影響を定量的に解析する手法を開発中である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

令和5年度には、シンガポールの海外共同研究先を研究分担者と共に訪問し、共同研究成果について有意義な議論を行うことが出来た。特にヒト表皮角化幹細胞については、令和5年度に論文として発表することが出来た。

Strategy for Future Research Activity

まず、ヒト表皮角化幹細胞において温度による幹細胞動態制御の詳細な分子機構を明らかにする。また、我々が開発したDeepACTによる培養幹細胞の品質管理システムが、温度による幹細胞動態変化を検出できるかを検証する。さらに、共同研究先が有する他の上皮系幹細胞でも温度の影響を解析する。

Report

(3 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (19 results)

All 2023 2022 2021 Other

All Int'l Joint Research (3 results) Journal Article (4 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 2 results) Presentation (11 results) (of which Invited: 8 results) Remarks (1 results)

  • [Int'l Joint Research] Duke-NUS Medical School(シンガポール)

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  • [Int'l Joint Research] Duke-NUS Medical School(シンガポール)

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  • [Int'l Joint Research] Duke-NUS Medical School/Skin Research Institute of Singapore(シンガポール)

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  • [Journal Article] Low temperature and mTOR inhibition favor stem cell maintenance in human keratinocyte cultures.2023

    • Author(s)
      Nanba D, Sakabe J, Mosig J, Brouard M, Toki F, Shimokawa M, Kamiya M, Braschler T, Azzabi F, Droz-Georget Lathion S, Johnsson K, Roy K, Schmid CD, Bureau JB, Rochat A, Barrandon Y.
    • Journal Title

      EMBO Reports

      Volume: - Issue: 6

    • DOI

      10.15252/embr.202255439

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      2023 Research-status Report 2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Single-cell analysis of human dermal fibroblasts isolated from a single male donor over 35 years2023

    • Author(s)
      Itai E, Atsugi T, Inomata K, Yamashita M, Kaji K, Nanba D, Naru E.
    • Journal Title

      Experimental Dermatology

      Volume: 32 Issue: 11 Pages: 1982-1995

    • DOI

      10.1111/exd.14929

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      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] EGFR-mediated epidermal stem cell motility drives skin regeneration through COL17A1 proteolysis2021

    • Author(s)
      Nanba D, Toki F, Asakawa K, Matsumura H, Shiraishi K, Sayama K, Matsuzaki K, Toki H, Nishumura EK.
    • Journal Title

      J Cell Biol

      Volume: 220 Issue: 11

    • DOI

      10.1083/jcb.202012073

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking2021

    • Author(s)
      Hirose T, Kotoku J, Toki F, Nishimura EK, Nanba D
    • Journal Title

      Stem Cells

      Volume: 39 Issue: 8 Pages: 1091

    • DOI

      10.1002/stem.3371

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] ヒト表皮角化幹細胞における細胞接着および細胞骨格の制御機構とその加齢変化2023

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第122回日本皮膚科学会総会
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      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 温度によるヒト表皮角化幹細胞制御2023

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第41回日本美容皮膚科学会総会・学術大会
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      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 皮膚の老化・再生とXVII型コラーゲン分解制御2023

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第96回日本生化学会大会
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      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 温度感受性TRPチャネル-mTORC1シグナル軸によるヒト表皮幹細胞動態制御2023

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第101回日本生理学会大会
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      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] XVII型コラーゲン分解制御と創傷治癒における表皮角化幹細胞動態制御2023

    • Author(s)
      難波大輔、土岐富士緒、浅川杏佑、松村寛行、白石研、佐山浩二、松崎恭一、土岐博、西村栄美
    • Organizer
      第22回日本再生医療学会総会
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      2022 Research-status Report
  • [Presentation] EGFR-mediated epidermal stem cell motility drives skin regeneration through COL17A1 proteolysis2022

    • Author(s)
      難波大輔
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      第19回幹細胞シンポジウム
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      2022 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] Alteration of human epidermal stem cell behavior in temperature fluctuations2022

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第55回日本発生生物学会
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      2022 Research-status Report
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  • [Presentation] Epidermal stem cell dynamics during skin regeneration2022

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第74回日本細胞生物学会
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      2022 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 皮膚の再生・老化とXVII型コラーゲン分解制御2022

    • Author(s)
      難波大輔
    • Organizer
      第27回日本病態プロテアーゼ学会学術集会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] EGFR-madiated epidermal stem cell mortility drives skin regeneration through COL17A1 ptoteolysis2022

    • Author(s)
      Daisuke Nanba, Fujio Toki, Kyosuke Asakawa, Hiroyuki Matsumra, Ken Shiraishi, oji Sayama, Kyoichi Matsuzaki, Hiroshi Toki, Emi K. Nishimura
    • Organizer
      日本研究皮膚科学会 第47回大会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking2021

    • Author(s)
      Hirose T, Kotoku J, Toki F, NIshimura EK, Nanba D
    • Organizer
      日本研究皮膚科学会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Remarks] 鳥取大学医学部医学科ゲノム再生医学講座再生医療学分野HP

    • URL

      https://sites.google.com/tottori-u.ac.jp/regeneration

    • Related Report
      2023 Research-status Report

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Published: 2021-10-22   Modified: 2024-12-25  

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