| Project/Area Number |
21KK0280
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| Research Category |
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 47060:Clinical pharmacy-related
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
山城 貴弘 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 講師 (20826614)
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| Project Period (FY) |
2022 – 2024
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥15,600,000 (Direct Cost: ¥12,000,000、Indirect Cost: ¥3,600,000)
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| Keywords | トランスポーター / イオンチャネル / クロストーク / SLC19A3 / 相互作用 / ピリドキシン |
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| Outline of Research at the Start |
申請者は、最近、哺乳類で初めてのピリドキシントランスポーターを同定することに成功し、イオンチャネルをはじめとしたイオン輸送体とのクロストークにより、ピリドキシンの体内動態に関与する可能性を見出した。さらに、そのピリドキシントランスポーターの遺伝子変異に起因する疾患へのピリドキシンの関与も示唆された。本研究では、ピリドキシントランスポーターと相互作用するイオン輸送体を探索・同定し、それらのクロストークによるピリドキシン体内動態を解明すると共に、その遺伝子変異による病態とピリドキシン輸送機能との関連性の解明に取り組む。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、哺乳類で初めてのピリドキシン（ビタミンB6）トランスポーターとして同定されたSLC19A3と相互作用するイオン輸送体を探索・同定し、それらのクロストークによるピリドキシンの体内動態の解明を目指すものである。
はじめに、アフリカツメガエル卵母細胞を用いたTEVC（two-electrode voltage clamp）法により、SLC19A3と相互作用するイオンチャネルの探索を行った。その結果、SLC19A3との共発現により、活性が増大するチャネルXを見出すことに成功した。一方で、SLC19A3と同様にピリドキシン輸送活性を有するSLC19A2との共発現では、チャネルXの活性に影響はみられず、SLC19A3との間での特異的な作用である可能性が示唆された。引き続いて、CHO-K1細胞一過性発現系により、チャネルXとの共発現がSLC19A3のピリドキシン輸送機能に及ぼす影響を検討した。その結果、チャネルXとの共発現により、SLC19A3を介したピリドキシン輸送は低下した。これらのことを踏まえて、SLC19A3とチャネルXが複合体を形成している可能性を考え、共免疫沈降法によりその検証を行った。しかし、複合体の形成を確認するには至らず、この点については実験条件の最適化を含めた今後のさらなる検討を要すると考えられる。
本研究により、SLC19A3と相互作用するイオンチャネルを見出すことができ、SLC19A3とイオンチャネルとのクロストークに関して理解を進展させることができた。また、SLC19A3に限らず、他のトランスポーターとイオンチャネルとのクロストークに関する研究ついても、継続的な共同研究基盤を築くことができた。
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