EBウイルスがコードする血中小RNAの診断、治療標的としての有用性に関する研究

• Project/Area Number: 22390087
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Virology
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 高田 賢蔵 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 教授 (30133721)
• Project Period (FY): 2010-04-01 – 2013-03-31
• Project Status: Declined (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥18,590,000 (Direct Cost: ¥14,300,000、Indirect Cost: ¥4,290,000); Fiscal Year 2012: ¥3,510,000 (Direct Cost: ¥2,700,000、Indirect Cost: ¥810,000); Fiscal Year 2011: ¥7,020,000 (Direct Cost: ¥5,400,000、Indirect Cost: ¥1,620,000); Fiscal Year 2010: ¥8,060,000 (Direct Cost: ¥6,200,000、Indirect Cost: ¥1,860,000)
• Keywords: EBV / 胃がん / EBER / La / モノクローナル抗体

Research Abstract

我々は、EBウイルス(EBV)陽性胃がん、上咽頭がんにおいてEBVがコードする小RNA分子EBERが宿主蛋白であるループス抗原Laとの複合体として細胞外へ放出され、そのEBERが自然免疫系のウイルス二本鎖RNA検知蛋白toll-like receptor 3(TLR3)を活性化し、その結果誘導されたインスリン様増殖因子IGF-1が、がん細胞のオートクライン増殖因子として作用していることを明らかにした。
今年度の研究で、市販の4種類のLa抗体がEBV陽性胃がん細胞の増殖を抑制するが、EBV陰性胃がん細胞の増殖へは影響を及ぼさないことを明らかにした。また、LaはEBV陽性細胞の培養上清中には存在するが、EBV陰性細胞の上清中には存在しないこと、すなわち、LaはEBERとの複合体を形成して初めて細胞外へ放出されることを明らかにした。血液中の抗La抗体はLaとの複合体として存在する可能性があるため、抗La抗体のスクリーニング法としてLa固相化ELISAの代わりにサンドイッチELISA法を確立した。しかし、SLA血清110検体中、抗La抗体陽性は1例のみであった。そこで、免疫沈降法による抗La抗体の検出を行った。SLE患者血清では6例全てに抗La抗体が存在することが確認された。しかし、血清をRNAse処理すると反応がみられなくなったことから、SLE血清中の抗La抗体はLaと反応するのではなく、LaとEBERの複合体を認識していると推測された。以上、SLE患者血清中に抗La抗体が存在することが確認され、SLE患者末梢血リンパ球からの抗体作製が可能なことが確認された。

Research Products

• [Journal Article] EBV lytic infection enhances transformation of B-lymphocytes infected with EBV in the presence of T-lymphocytes (2012)
  • Author(s): Katsumura, K.R., Maruo, S., Takada, K.
  • Journal Title: J.Med.Virol. Volume: 84 Issue: 3 Pages: 504-510
  • DOI: 10.1002/jmv.23208
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A novel animal model of Epstein-Barr virus-associated hemophagocytic lymphohistiocytosis in humanized mice (2011)
  • Author(s): Sato K, Misawa N, Nie C, Satou Y, Iwakiri D, Matsuoka M, Takahashi R, Kuzushima K, Ito M, Takada K, Koyanagi Y
  • Journal Title: Blood Volume: 117 Issue: 21 Pages: 5663-5673
  • DOI: 10.1182/blood-2010-09-305979
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Adenovirus virus-associated RNAs induce type I interferon expression a RIG-I-mediated pathway (2011)
  • Author(s): Minamitani, T., Iwakiri, D., Takada, K.
  • Journal Title: J.Virol Volume: 85 Issue: 8 Pages: 4035-4040
  • DOI: 10.1128/jvi.02160-10
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epstein-Barr virus infection in immortalized nasopharyngeal epithelial cells : Regulation of infection and phenotypic characterization. (2010)
  • Author(s): Tsang, C.M.
  • Journal Title: Int.J.Cancer Volume: 127 Pages: 1570-1583
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Downregulation of microRNA-200 in EBV-associated gastric carcinoma. (2010)
  • Author(s): Shinozaki, A
  • Journal Title: Cancer Res. Volume: 70 Pages: 4719-4727
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Endogenous latent membrane protein 1 in Epstein-Barr virus-infected nasopharyngeal carcinoma cells attracts T lymphocytes through upregulation of multiple chemokines. (2010)
  • Author(s): Lai, H.C.
  • Journal Title: Virology Volume: 405 Pages: 464-473
  • Peer Reviewed
• [Presentation] The role of EBER, BARF1 abd lytic infection in NPC (2011)
  • Author(s): Takada, K
  • Organizer: 5^<th> International Symposium on Nasopharyngeal Carcinoma
  • Place of Presentation: Rasa Sayang Hotel (Malaysia)(招待講演)
  • Year and Date: 2011-06-23