癌の診断・予後判定に有用な遺伝子マーカーの前向き研究による開発と臨床検査への応用

• Project/Area Number: 22390115
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Laboratory medicine
• Research Institution: Yamaguchi University
• Principal Investigator: 日野田 裕治 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10165128)
• Project Period (FY): 2010-04-01 – 2013-03-31
• Project Status: Declined (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥17,550,000 (Direct Cost: ¥13,500,000、Indirect Cost: ¥4,050,000); Fiscal Year 2012: ¥5,590,000 (Direct Cost: ¥4,300,000、Indirect Cost: ¥1,290,000); Fiscal Year 2011: ¥5,590,000 (Direct Cost: ¥4,300,000、Indirect Cost: ¥1,290,000); Fiscal Year 2010: ¥6,370,000 (Direct Cost: ¥4,900,000、Indirect Cost: ¥1,470,000)
• Keywords: Colorectal cancer / Frizzled-7 / Wnt11 / mRNA / KRAS / Renal cell carcinoma / DKK3 / DKK4 / 大腸癌 / 腎細胞癌 / DNAメチル化 / Wntシグナル経路 / FFPE

Research Abstract

大腸癌については次の点を明らかにした。1)Frizzled-7のリガンド候補であるWnt11のmRNA発現を定量PCRで調べた結果、非癌部に比較して癌部では病期に関係なく発現の増加を認めた術後無再発例に比べて、再発あるいは死亡例では有意に高値であった。また、Wnt11とFrizzled-7mRNAの発現レベルは有意に相関していた。さらに、Wnt11遺伝子導入細胞ではmock細胞に比べて増殖能およびin vitro浸潤能が増加した。2)ホルマリン固定パラフィン包埋切片を使用したKRAS変異検査の基礎的検討を行い、アンプリコンサイズが278bp以下であればほぼ100%検査可能であり、保存期間や脱パラフィン条件は無視し得るととが明らかになった。3)治癒切除木能な進行・再発大腸癌を対象とした2つの第二相試験を通じて(n=251)、codon 12,13以外のKRAS変異、BRAF変異、PIK3CA変異のいずれもがcetuximabの治療効果予測因子となることを示した。
腎細胞癌については次の点を明らかにした。1)Wnt antagonistの1つであるDKK3の発現が癌部で低下しており、DKK3遺伝子導入細胞は対象細胞に比べて増殖能が低下し、アポトーシスが亢進した。この際、G0/G1アレストとP21の発現増加を伴い、non-canonical JNK経路を介することが示された。さらに、遺伝子導入細胞は、in vivo腫瘍形成能が低下した。2)DKK4遺伝子導入細胞では、核内beta-catenin、cychn D1、c-Mycの発現低下を認めたが、in vitro浸潤能・運動能およびin vivo増殖能は亢進していた。シグナル経路としてnon-canonical JNK経路の関与が示された。

Research Products

• [Journal Article] Possible involvement of Wnt11 in colorectal cancer progression (2011)
  • Author(s): Nishioka M, et al
  • Journal Title: Mol Carcinog Volume: (Epub ahead of print)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The importance of evaluation of DNA amplificability in KRAS mutation testing with dideoxy sequencing using formalin-fixed and paraffin-embedded colorectal cancer tissues (2011)
  • Author(s): Okayama N, et al
  • Journal Title: Jpn J Clin Oncol Volume: 41 Pages: 165-171
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Wnt antagonist DICKKOPF-3(Dkk-3) induces apoptosis in human renalcell carcinoma (2011)
  • Author(s): Ueno K, et al
  • Journal Title: Mol Carcinog Volume: 50 Pages: 449-457
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] DICKKOPF-4 activates the noncanonical c-Jun-NH2 kinase signaling pathway while inhibiting the Wnt-canonical pathway in human renal cell carcinoma (2011)
  • Author(s): Hirata H, et al
  • Journal Title: Cancer Volume: 117 Pages: 1649-1660
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Role of secreted frizzled-related protein 3 in human renal cell carcinoma. (2010)
  • Author(s): Hirata H, et al.
  • Journal Title: Cancer Res Volume: 70 Pages: 1896-1905
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Methylation level of the RASSF1A promoter is an independent prognostic factor for clear-cell renal cell carcinoma. (2010)
  • Author(s): Kawai Y, et al.
  • Journal Title: Ann Oncol Volume: 21 Pages: 1612-1617
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Phase I study of irinotecan and doxifluridine for metastatic colorectal cancer focusing on the UGT1A1*28 polymorphism. (2010)
  • Author(s): Hazama S, et al.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 101 Pages: 722-727
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Tumor suppressor microRNA-493 directly decreases growth and invasion in human bladder cancer by targeting Rhoc (2011)
  • Author(s): Koji Ueno, et al
  • Organizer: 日本癌学会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県名古屋市)
  • Year and Date: 2011-10-04
• [Presentation] 大腸癌におけるWnt11発現と予後 (2010)
  • Author(s): 西岡光昭, 他
  • Organizer: 第69回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪市 大阪国際コンベンションセンター
  • Year and Date: 2010-09-14
• [Patent(Industrial Property Rights)] Siaa2-8Siaa2-3Galb-R糖鎖持つムチン1の分析方法 (2010)
  • Inventor(s): 山下克子, 他
  • Industrial Property Rights Holder: 東京工業大学山口大学
  • Industrial Property Number: 2010-125766
  • Filing Date: 2010-06-01