肺がん幹細胞特異的CTLが認識する抗原の同定研究

• Project/Area Number: 22501028
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Tumor immunology
• Research Institution: Aichi Cancer Center Research Institute
• Principal Investigator: 葛島 清隆 愛知県がんセンター(研究所), その他 (30311442)
• Project Period (FY): 2010 – 2012
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2011)
• Budget Amount: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000); Fiscal Year 2011: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2010: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 癌 / 免疫学 / トランスレーショナルリサーチ

Research Abstract

肺がん細胞株E522Lはadenocarcinoma組織から樹立された細胞株で、β_2ミクログロブリン蛋白の発現消失により細胞表面にHLA class-I分子を全く発現しない。目的とするHLA-A24を細胞表面に発現させるために、β_2ミクログロブリンとHLA-A24重鎖をグリシン-セリンのリンカーで共有結合させた単鎖HLA-A24分子およびCD86分子をこの細胞株に導入し、CTL誘導のための人工抗原提示細胞を作製した。
この人工抗原提示細胞から"がん幹細胞"の形質を持った細胞を得るために、無血清培地にEGF、 bFGFなどの幹細胞増殖因子を添加して数週間培養し、球状の塊で増殖する細胞集団(以後スフェアと称す)を得た。造腫瘍性を確認するために、スフェアと元のE522L細胞を免疫不全マウスの皮下にそれぞれ100万個ずつ接種した。しかしながら、スフェアにおいても3匹中1匹で腫瘍の形成がみられるだけであった。また、"がん幹細胞"の自己刷新性の維持に必要な転写因子(Naonog, Sox2, Oct-4など)の発現をRT-PCR法で検討したが、元のE522L細胞とスフェア間で明らかな違いを見出すことができなかった。
今回、"がん幹細胞"培養条件で得られたスフェアは、当初の予想に反して"がん幹細胞"としての形質を保有していないことが判明した。現在、他の肺がん細胞株数種からスフェアを培養し、"がん幹細胞"の形質を保有しているものを探している。そのような細胞を同定した後に、人工抗原提示細胞に変換してCTLの誘導を進める予定である。