Controlled intracellular delivery of Multi-functional siRNA and gene silencing

• Project/Area Number: 22550159
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Chemistry related to living body
• Research Institution: Kinki University
• Principal Investigator: FUJII Masayuki 近畿大学, 産業理工学部, 教授 (60199297)
• Project Period (FY): 2010 – 2012
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2012: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2011: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2010: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
• Keywords: 生体機能関連化学 / siRNA / マルチコンジュゲート / 細胞質局在化 / 遺伝子サイレンシング / パプチド遺伝子導入剤 / ヌクレアーゼ耐性 / ペプチド遺伝子導入剤

Research Abstract

The expression of bcr/abl gene in K562 cells were suppressed to 8.3% at 200nM and 11.6 % at 50nM by siRNA-NES conjugates synthesized solid phase fragment coupling. It was also found that the complex of siRNA and novel peptides (Pfect) was taken up into cells with comparable efficiency to commercially available lipofection reagent. The expression of bcr/abl gene was suppressed to 0.5% by the complex of siRNA-NES conjugate and Pfect. The complex of siRNA and Pfect showed no cyto-toxicity and an intensive resistance against nucleases digestion to extend the half-life time over 48 hours.

Research Products

• [Journal Article] Base-pairing selectivity of a ureido-linked phenyl-2'-deoxycytidine derivative (2012)
  • Author(s): Shu-ichi Nakano, Hirohito Oka, Yuuki Uotani, Kazuya Uenishi, Masayuki Fujii and Naoki Sugimoto
  • Journal Title: Organic & Biomolecular Chemistry Volume: 10 Pages: 9664-9670
• [Journal Article] Non-toxic delivery of siRNA by amphiphilic peptides and silencing of hTERT (2012)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Shutaro Fujiaki
  • Journal Title: Journal of Peptide Science Volume: 18 Pages: 498-499
• [Journal Article] Base-pairing selectivity of a ureido-linked phenyl-2’-deoxycytidine derivative (2012)
  • Author(s): Masayuki Fujii 他5名
  • Journal Title: Organic & Biomolecular Chemistry Volume: 10 Issue: 48 Pages: 9664-9670
  • DOI: 10.1039/c2ob26897c
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Synthesis, Delivery and Gene Silencing of siRNA-NES Conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Irmina Diala
  • Journal Title: Progress in Drug Delivery Systems Volume: 10 Pages: 91-96
  • NAID: 120005737503
• [Journal Article] Use of Nucleic Acid Analogs for the Study of Nucleic Acid Interactions (2011)
  • Author(s): Shu Ichi Nakano, Masayuki Fujii and Naoki Sugimoto
  • Journal Title: Journal of Nucleic Acids Volume: 2011 Pages: 1-11
• [Journal Article] Synthesis, Delivery and Gene Silencing of sIRNA-NES Conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Journal Title: Progress in Drug Delivery Systems Volume: 10 Pages: 91-96
  • NAID: 120005737503
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Highly Enhanced Silencing of bcr/abl Gene by siRNA-NES Peptide Conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Yuichi Akagi
  • Journal Title: Peptide Science Volume: 2010 Pages: 379-379
  • NAID: 10028238243
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Synthesis of and gene silencing by oligonucleotide-peptide conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii
  • Journal Title: Peptide Science Volume: 2010 Pages: 380-380
  • NAID: 10028238249
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Synthesis of oligonucleotide-peptide conjugates by solid phase fragment condensation (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala, 他2名
  • Journal Title: Peptide Science Volume: 2010 Pages: 381-381
  • NAID: 10028238260
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Controlled Intracellular Delivery and Antisense Inhibition of DNA-Peptide Conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Journal Title: Peptide Science Volume: 2010 Pages: 382-382
  • NAID: 10028238267
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Specific Inhibition of Human Telomerase Activity by siRNA and Phosphorothioate Oligonucleotide-Peptide Conjugates (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Journal Title: Peptide Science Volume: 2010 Pages: 383-383
  • NAID: 10028238270
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Stacking interaction in the middle and at the end of a DNA helix studied with non-natural nucleotides (2010)
  • Author(s): Shu-ichi Nakano, Hirohito Oka, Yuuki Uotani, Kazuya Uenishi, Masayuki Fujii and Naoki Sugimoto
  • Journal Title: Molecular BioSystems Volume: 6 Pages: 2023-2029
• [Journal Article] Specific Suppression of bcr/abl mRNA by Chemically Modified siRNAs Targeting b3a2 Transcripts (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala, Kazuya Uenishi, Shu-ichi Nakano3 and Naoki Sugimoto
  • Journal Title: Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids Volume: 29 Pages: 548-549
• [Journal Article] Synthesis of siRNA-Peptide Conjugates by Solid Phase Fragment Condensation (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Irmina Diala
  • Journal Title: Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids Volume: 29 Pages: 546-547
• [Journal Article] Highly Enhanced Silencing Effect by siRNA-Nuclear Export Signal Peptide Conjugates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Irmina Diala
  • Journal Title: Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids Volume: 29 Pages: 544-545
• [Journal Article] Suppression of Telomerase Activity and Proliferation of Cancer Cell Lines by siRNA Targeting hTERT mRNA (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Irmina Diala
  • Journal Title: Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids Volume: 29 Pages: 542-543
• [Journal Article] Highly Enhanced Silencing Effect by siRNA-Nuclear Eeport Signal Peptide Conjugates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Journal Title: Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids Volume: 29 Pages: 544-545
  • Peer Reviewed
• [Presentation] シグナルペプチドコンジュゲートによるsiRNAの細胞内デリバリーと遺伝子サイレンシング (2013)
  • Author(s): 藤明 修太郎・小幡 淳一・藤井 政幸
  • Organizer: 日本化学会第93春期年会
  • Place of Presentation: 立命館大学びわこ・くさつキャンパス
• [Presentation] 塩基性両親媒性ペプチドと二重鎖核酸との相互作用 (2012)
  • Author(s): 西川 勇輝 、増田 春菜、松原 愛、藤井 政幸
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2012-06-30
• [Presentation] 新規両親媒性ペプチドによるsiRNAの無毒性細胞導入とhTERT遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 池辺 貴彦、橋本 武志、藤井 政幸
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2012-06-30
• [Presentation] 核酸とペプチドの機能融合によるbcr/abl遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 小幡 淳一、山岡 史典、藤井 政幸
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2012-06-30
• [Presentation] 新規ハイブリッドペプチドによるsiRNAの細胞導入 (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎、行武 陽介、藤井 政幸
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2012-06-30
• [Presentation] siRNA-ペプチド機能融合によるデリバリー、遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸
  • Organizer: 日本薬学会第132年会
  • Place of Presentation: 北海道大学(札幌市)
  • Year and Date: 2012-03-28
• [Presentation] 両親媒性ペプチドによるsiRNAの無毒性細胞内デリバリーとhTERTサイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎、藤井政幸
  • Organizer: 日本化学会第92回春季年会
  • Place of Presentation: 慶応大学日吉キャンパス(横浜市)
  • Year and Date: 2012-03-25
• [Presentation] ペプチドと核酸の機能融合による細胞内デリバリーと遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎、藤井政幸
  • Organizer: 日本化学会第92回春季年会
  • Place of Presentation: 慶応大学日吉キャンパス(横浜市)
  • Year and Date: 2012-03-25
• [Presentation] siRNA-ペプチド複合体による細胞内デリバリーと遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸,藤明修太郎,小幡淳一
  • Organizer: 第30回メディシナルケミストリーシンポジウム
  • Place of Presentation: タワーホール船堀、東京
• [Presentation] Specific Delivery of siRNA by Amphiphilic Peptide-Signal Peptide Conjugates (2012)
  • Author(s): Shutaro Fujiaki, Junichi Obata, Masayuki Fujii
  • Organizer: 第39回国際核酸化学シンポジウム
  • Place of Presentation: 名古屋
• [Presentation] 核酸とペプチドの機能融合によるbcr/abl遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 小幡淳一・藤明修太郎・藤井政幸
  • Organizer: 2012年日本化学会西日本大会
  • Place of Presentation: 佐賀
• [Presentation] 新規ハイブリッドペプチドによるsiRNAの細胞導入と遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎・小幡淳一・藤井政幸
  • Organizer: 2012年日本化学会西日本大会
  • Place of Presentation: 佐賀
• [Presentation] 新規小ペプチドによるsiRNAの無毒性細胞導入 (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、藤明修太郎、小幡淳一
  • Organizer: 第49回ペプチド討論会
  • Place of Presentation: 鹿児島
• [Presentation] Non-toxic Delivery and Gene Silencing by siRNA-Hybrid Peptide Complex (2012)
  • Author(s): Shutaro Fujiaki, Junichi Obata, Masayuki Fujii
  • Organizer: 8th Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutics Society
  • Place of Presentation: Boston, MA.
• [Presentation] ペプチド‐siRNA複合体の無毒性細胞導入と遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎,小幡淳一,藤井政幸
  • Organizer: 第2回CSJ化学フェスタ
  • Place of Presentation: 横浜(慶応大学日吉キャンパス)
• [Presentation] 両親媒性ハイブリッドペプチドによるsiRNA特異的無毒性細胞導入 (2012)
  • Author(s): 藤井政幸・藤明修太郎・小幡淳一
  • Organizer: 第22回アンチセンスシンポジウム
  • Place of Presentation: 仙台
• [Presentation] Non-toxic delivery of siRNA by amphiphilic peptides and silencing of hTERT (2012)
  • Author(s): Masayuki Fujii and Shutaro Fujiaki
  • Organizer: 32nd European Peptide Symposium
  • Place of Presentation: Athen
• [Presentation] NON-TOXIC INTRACELLULAR DELIVERY AND EFFICIENT GENE SILENCING BY FUNCTIONAL FUSION OF SIRNA AND PEPTIDES (2012)
  • Author(s): Shutaro Fujiaki and Masayuki Fujii
  • Organizer: XX International Roundtable on Nucleosides Nucleotides and Nucleic Acids
  • Place of Presentation: Montreal
• [Presentation] 両親媒性ペプチドによるsiRNAの無毒性細胞内デリバリーとhTERTサイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎、藤井政幸
  • Organizer: 日本化学会第92回春季年会
  • Place of Presentation: 慶応大学日吉キャンパス
• [Presentation] ペプチドと核酸の機能融合による細胞内デリバリーと遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤明修太郎、藤井政幸
  • Organizer: 日本化学会第92回春季年会
  • Place of Presentation: 慶応大学日吉キャンパス
• [Presentation] NON-TOXIC INTRACELLULAR DELIVERY AND EFFICIENT GENE SILENCING BY FUNCTIONAL FUSION OF SIRNA AND PEPTIDES (2012)
  • Author(s): 藤井政幸 他1名
  • Organizer: XX International Roundtable on Nucleosides Nucleotides and Nucleic Acids
  • Place of Presentation: モントリオール
• [Presentation] Non-toxic delivery of siRNA by amphiphilic peptides and silencing of hTERT (2012)
  • Author(s): 藤井政幸 他1名
  • Organizer: 32nd European Peptide Symposium
  • Place of Presentation: アテネ
• [Presentation] 両親媒性ハイブリッドペプチドによるsiRNA特異的無毒性細胞導入 (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、他2名
  • Organizer: 第22回アンチセンスDNA/RNA研究会シンポジウム
  • Place of Presentation: 仙台
• [Presentation] ペプチド‐siRNA複合体の無毒性細胞導入と遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、他2名
  • Organizer: 第2回CSJ化学フェスタ2012
  • Place of Presentation: 慶応大学日吉キャンパス
• [Presentation] Non-toxic Delivery and Gene Silencing by siRNA-Hybrid Peptide Complex (2012)
  • Author(s): 藤井政幸 他1名
  • Organizer: 8th Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutics Society
  • Place of Presentation: ボストン
• [Presentation] 核酸とペプチドの機能融合によるbcr/abl遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、他2名
  • Organizer: 2012年日本化学会西日本大会
  • Place of Presentation: 佐賀大学
• [Presentation] 新規ハイブリッドペプチドによるsiRNAの細胞導入と遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、他2名
  • Organizer: 2012年日本化学会西日本大会
  • Place of Presentation: 佐賀大学
• [Presentation] Specific Delivery of siRNA by Amphiphilic Peptide-Signal Peptide Conjugates (2012)
  • Author(s): 藤井政幸、他2名
  • Organizer: 第39回国際核酸化学シンポジウム
  • Place of Presentation: 名古屋大学
• [Presentation] siRNA-ペプチド複合体による細胞内デリバリーと遺伝子サイレンシング (2012)
  • Author(s): 藤井政幸 他1名
  • Organizer: 第30回メディシナルケミストリーシンポジウム
  • Place of Presentation: タワーホール船堀
• [Presentation] Specific Delivery of siRNA by amphiphilic Peptides and Silencing of hTERT (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Diala Irmina
  • Organizer: 11^<th> US-Japan Symposium on Drug Delivery System
  • Place of Presentation: ウエスチンホテル(ハワイマウイ島ラハイナ)
  • Year and Date: 2011-12-16
• [Presentation] Specific Delivery of siRNA by Hybrid Peptides and Silencing of hTERT (2011)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Diala Irmina
  • Organizer: 第38回核酸化学シンポジウム
  • Place of Presentation: 北海道大学(札幌市)
  • Year and Date: 2011-11-09
• [Presentation] siRNA-NESコンジュゲートによるbcr/abl遺伝子発現制御 (2011)
  • Author(s): 藤井政幸, Irmina Diala
  • Organizer: 第20回DDSカンファランス
  • Place of Presentation: 静岡県コンベンションアーツセンター(静岡市)
  • Year and Date: 2011-09-16
• [Presentation] siRNA-NESコンジュゲートの合成、デリバリー、遺伝子サイレンシング (2011)
  • Author(s): 藤井政幸,Irmina Diala
  • Organizer: 第20回DDSカンファランス
  • Place of Presentation: 静岡
• [Presentation] siRNA-NESペフチドコンジュゲートの合成、デリバリー、サイレンシング効果 (2010)
  • Author(s): 赤城雄一、Irmina Diala、藤井政幸
  • Organizer: 第20回アンチセンスシンポジウム
  • Place of Presentation: 神戸、甲南大学
  • Year and Date: 2010-12-02
• [Presentation] 酵素的固相ペプチド合成法の開発(1)リパーゼによる固相担体からの切り出し (2010)
  • Author(s): 赤城雄一、利光貴紀、松本一真、藤井政幸
  • Organizer: 第47回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2010-07-10
• [Presentation] 酵素的固相ペプチド合成法の開発(2)イオン性液体中でのリパーゼによる固相担体からの切り出し (2010)
  • Author(s): 西條清伸、赤城雄一、中野健一、藤井政幸
  • Organizer: 第47回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2010-07-10
• [Presentation] 酵素的固相ペプチド合成法の開発(3)リパーゼによる固相担体からの切り出しにおけるマイクロ波照射の効果 (2010)
  • Author(s): 三浦航, 赤城雄一, 片岡翔太, 寺田佳毅、藤井政幸
  • Organizer: 第47回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
  • Year and Date: 2010-07-10
• [Presentation] SYNTHESIS OF siRNA-PEPTIDE CONJUGATES BY SOLID PHASE FRAGMENT CONDENSATION (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: XIX International Round Table "Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids"
  • Place of Presentation: フランス、リヨン大学
• [Presentation] HIGHLY ENHANCED SILENCING EFFECT BY siRNA-NUCLEAR EXPORT SIGNAL PEPTIDE CONJUGATES (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: XIX International Round Table "Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids"
  • Place of Presentation: フランス、リヨン大学
• [Presentation] SUPPRESSION OF TELOMERASE ACTIVITY AND PROLIFERATION OF CANCER CELL LINES BY siRNA TARGETING hTERT mRNA (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: XIX International Round Table "Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids"
  • Place of Presentation: フランス、リヨン大学
• [Presentation] SPECIFIC SUPPRESSION OF BCR-ABL mRNA BY CHEMICALLY MODIFIED siRNAs TARGETING b3a2 TRANSCRIPTS (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: XIX International Round Table "Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids"
  • Place of Presentation: フランス、リヨン大学
• [Presentation] SYNTHESIS AND HIGHLY ENHANCED SILENSING EFFECT OF siRNA-NES PEPTIDE CONJUGATES (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: The 6^<th> Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutic Society
  • Place of Presentation: カリフォルニア、ダナポイント
• [Presentation] Synthesis and highly enhanced silencing effect of siRNA-NES conjugates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: The 37^<th> International Symposium on Nucleic Acids Chemistry 2010
  • Place of Presentation: 横浜、はまぎんホール
• [Presentation] Synthesis of and gene silencing by oligonucleotide-peptide conjugates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii
  • Organizer: The 5^<th> International Peptide Symposium
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
• [Presentation] Highly Enhanced Silencing of bcr/abl Gene by siRNA-NES Peptide Conjugates (2010)
  • Author(s): Yuichi Akagi, Masayuki Fujii
  • Organizer: The 5^<th> International Peptide Symposium
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
• [Presentation] Synthesis of Oligonucleotide-Peptide Conjugates by Solid Phase Fragment Condensation (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala, 他2名
  • Organizer: The 5^<th> International Peptide Symposium
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
• [Presentation] Controlled Intracellular Delivery and Antisense Inhibition of DNA-Peotide Coniueates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: The 5^<th> International Peptide Symposium
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
• [Presentation] Specific Inhibition of Human Telomerase Activity by siRNA and Phosphorothioate Oligonucleotide-Peptide Conjugates (2010)
  • Author(s): Masayuki Fujii, Irmina Diala
  • Organizer: The 5^<th> International Peptide Symposium
  • Place of Presentation: 京都国際会議場
• [Presentation] 塩基性両親媒性ペプチドと二重鎖核酸との相互作用
  • Author(s): 藤井政幸 他3名
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
• [Presentation] 新規両親媒性ペプチドによるsiRNAの無毒性細胞導入とhTERT遺伝子サイレンシング
  • Author(s): 藤井政幸 他2名
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
• [Presentation] 核酸とペプチドの機能融合によるbcr/abl遺伝子サイレンシング
  • Author(s): 藤井政幸 他2名
  • Organizer: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場
• [Book] 第3版マクマリー・生物有機化学 (2011)
  • Author(s): J.McMurry, M.Castellion, D.Ballantine著、菅原二三男監訳, 共訳者10名
  • Total Pages: 937
  • Publisher: 丸善出版
• [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞への核酸導入方法、核酸キャリア及び核酸複合体 (2013)
  • Inventor(s): 藤井政幸
  • Industrial Property Rights Holder: 藤井政幸
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Filing Date: 2013-01-09
  • Overseas
• [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞への核酸導入方法、核酸キャリア及び核酸複合体 (2011)
  • Inventor(s): 藤井政幸
  • Industrial Property Rights Holder: (財)北九州産業学術推進機構
  • Filing Date: 2011-07-07
  • Overseas
• [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞への核酸導入方法、核酸キャリア及び核酸複合体 (2011)
  • Inventor(s): 藤井政幸
  • Industrial Property Rights Holder: (財)北九州産業学術推進機構
  • Filing Date: 2011-07-07
  • Overseas
• [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞への核酸導入方法、核酸キャリアおよび核酸複合体 (2010)
  • Inventor(s): 藤井政幸
  • Industrial Property Rights Holder: 財団法人北九州産業学術推進機構
  • Industrial Property Number: 2010-157367
  • Filing Date: 2010-07-10