消化管炎症における糖鎖不全上皮の発癌ポテンシャル

Research Project

Project/Area Number	22790680
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Gastroenterology
Research Institution	Research Institute, International Medical Center of Japan
Principal Investigator	フォンサイセイボンソワン (フオンサイセイボンソワン) 独立行政法人国立国際医療研究センター, 研究員 (50505815)
Project Period (FY)	2010
Project Status	Completed (Fiscal Year 2011)
Budget Amount *help	¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000) Fiscal Year 2011: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000) Fiscal Year 2010: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Keywords	糖鎖 / DNAメチル化 / 糖転移酵素 / 大腸癌 / 大腸炎 / 上皮細胞
Research Abstract	機能的糖鎖分子は、複数の糖転移酵素により協同的に合成される。その合成に関与する複数の、しかも同じ合成経路上の"糖鎖合成遺伝子"が、同時にDNAメチル化によりエピジェネティックに制御を受けているということが明らかとなった。この事実は、この機構が何らかの生理的意義を持ち、かつ極めてシステマティックに発現調節をされていることを示唆している。そこで申請者らは、炎症消化管で見られるエピジェネティックな"糖付加低下"機構が、組織修復過程における上皮再生に関わっているのではないかと考えた。更に、上皮再生の際に"組織幹細胞"に糖付加低下機構が作用することで発癌ポテンシャルを付与し、"癌幹細胞"様の発癌の芽が生じるとの仮説を立て、証明を試みた。 23年度は炎症粘膜における"発癌ポテンシャル"を有した細胞の同定を目的とし、発癌剤アゾキシメタン+デキストラン硫酸ナトリウム(大腸炎の誘導)投与により作製したマウス炎症-発癌モデルから、上皮細胞を分離する方法を確立した。すなわち炎症を起こしている大腸からEDTAを用いてsingle cell suspensionとする条件を確立し、さらにEpCAM1, CD45および7AADによる染色を行い、フローサイトメトリーを用いて上皮細胞を高純度でソートすることが可能となった。正常組織から回収された細胞とともに十分量の細胞をプールし、分子発現の解析を行う予定である。