代謝性疾患病態形成におけるTwist1の機能解析と会合分子群の網羅的解析

• Project/Area Number: 22790845
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Metabolomics
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 藤本 昌紀 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (20451742)
• Project Period (FY): 2010-04-01 – 2014-03-31
• Project Status: Declined (Fiscal Year 2013)
• Budget Amount: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2013: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000); Fiscal Year 2012: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2011: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2010: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: 転写因子 / 肥満 / 代謝異常 / 褐色脂肪 / Twist1 / 動脈硬化 / クロマチン会合分子

Research Abstract

昨年度作成したFlag-tag融合型Twist1アデノウイルスを用いて、白色脂肪細胞株に感染させ、抗HA抗体、Flag抗体で免疫沈降し、SDS-PAGE、銀染色後、マススペクトロメトリーを行った。また、Twist1の発現により、遺伝子発現のプロファイルがどのように変化するかを検討した。マクロファージと脂肪組織においてTwist1が高発現している、ap2-Twist1-Transgenic (Tg)マウスおよび野生型マウスより、骨髄由来マクロファージを採取、RNAを抽出し、マイクロアレイにより検討を行った。結果として炎症や泡沫化に関わる幾つかの遺伝子群が、変化していることが判明した。そして、Twist1の動脈硬化巣における役割についての検討を行った。動脈硬化巣においては、マクロファージの炎症と泡沫化が重要な役割を果たすことが知られる。代表的な粥状動脈硬化モデルである高脂肪食負荷ApoE KOマウスで、免疫染色法にて評価したところ、動脈硬化巣の内膜下に浸潤しているマクロファージにおいて、Twist1が発現していた。また、動脈硬化巣で発現が上昇する炎症性サイトカインTNF-αでマクロファージを刺激すると、Twist1の発現が上昇することがわかった。一方、Twist1を強制発現したマクロファージでは、泡沫化は変化を認めなかったが、炎症は抑制されていた。さらに、in vivoにおける役割を検討するため、10週齢の♂Tg　ApoE KO及び野生型ApoE KO マウスに抗コレステロール食負荷を10週間行い、大動脈弁口部の動脈硬化度を比較検討した。Tg ApoE KO　マウスでは、野生型Apo E KO マウスに比して、約3倍動脈硬化が促進していた。

Current Status of Research Progress

Reason

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] The roles of transforming growth factor-β and Smad3 signaling in adipocyte
  • Author(s): Tsurutani Y, Fujimoto M, Takemoto M, Irisuna H, Koshizaka differentiation and obesity M, Onishi S, Ishikawa T, Mezawa M, He P, Honjo S, Maezawa Y, Saito Y, Yokote K.
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications Volume: (印刷中)
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 動脈硬化病変におけるTwist1の機能解析 (2012)
  • Author(s): 岡部恵見子
  • Organizer: 動脈硬化学会
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 2012-07-05
• [Presentation] Twist-1 in macrophage is Expressed in Atherosclerotic Lesion Macrophages and protects against progression of atherosclerosis. (2012)
  • Author(s): 藤本昌紀
  • Organizer: 日本動脈硬化学会
  • Place of Presentation: 福岡