| Project/Area Number |
22H04399
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Review Section |
3240:Society medicine, nursing, and related fields
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| Research Institution | 石川県警察科学捜査研究所 |
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Principal Investigator |
Kubo Seiji 石川県警察科学捜査研究所, 公務員
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥330,000 (Direct Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥330,000 (Direct Cost: ¥330,000)
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| Keywords | RPA法 / ダイレクト法 / 血液 / ヘモグロビン / mRNA / 体液識別 |
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| Outline of Research at the Start |
犯罪現場に遺留された試料について、体液種の同定は犯罪の立証に極めて重要である。mRNAは体液種の指標として有用なマーカーであるが、従来のRT-qPCR法による検出は時間と手間がかかる。本研究では、簡易的なRNA抽出法と等温増幅の反応系であるRT-RPA法を組み合わせることで、体液特異的なmRNAの迅速・簡便なスクリーニング法の開発を目指す。
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| Outline of Final Research Achievements |
本研究では、等温増幅（42℃）かつ短時間（20分）の反応系であるRT-RPA法を利用し、血液の指標となるHemoglobin beta (HBB) mRNAを迅速・簡便に検出する方法を開発した。本法により、100 fg相当の白血球RNAあるいは1 nL相当の血液からHBBを検出することが可能であった。また、簡易的なRNA抽出法を組み合わせたダイレクトRT-RPA法により、30分程度でHBBの有無が判定可能となった。これらの結果から、RT-RPA法が血液のスクリーニング検査として有効であることが示唆された。
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
犯罪現場に遺留される試料について、体液種の証明は犯罪の立証に重要である。mRNAは体液識別の有用なマーカーであるが、従来のRT-qPCR法による工程は時間と手間がかかる。本研究で開発したRT-RPA法は、RT-qPCR法に比べて迅速・簡便な方法であり、法科学鑑定の効率化に貢献できると考えられる。また、反応温度（42℃）が低く、精密な温度管理が不要であることから、実験室だけではなく現場での利用が期待できる。
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