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Optical diffraction tomography for high-accuracy label-free 3D bioimaging

Research Project

Project/Area Number 22K04974
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 30020:Optical engineering and photon science-related
Research InstitutionKindai University

Principal Investigator

吉田 周平  近畿大学, 理工学部, 准教授 (10632606)

Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Keywords光回折トモグラフィ / ディジタルホログラフィ / バイオイメージング / ラベルフリー / ホログラフィ / トモグラフィ
Outline of Research at the Start

本研究では,ディジタルホログラフィにトモグラフィの手法を応用した光回折トモグラフィにより,病理組織診断や細胞の形態学的特性評価などに応用可能な,高精度な3次元バイオイメージングを実現することを目的とする.光回折トモグラフィはディジタルホログラフィと比較して光軸方向の分解能が高く,細胞の内部器官や代謝活動などの生物物理学的パラメータと相関した3次元屈折率分布を再構成できるため,臨床応用や細胞生物学などへの幅広い応用展開が期待できる.

Outline of Annual Research Achievements

昨年度の成果を踏まえて2023年度は主として実験による屈折率分布の可視化に取り組んだ。
光回折トモグラフィ(ODT)では、散乱ポテンシャルおよび屈折率分布の再構成には位相を含む物体の複素振幅分布を必要とする。本研究では物体の複素振幅分布を測定する手法としてディジタルホログラフィ(DH)を用いた。DHにおいてホログラムから物体光を抽出する手法として広く用いられている位相シフト法では、解像度の高い物体光が得られる反面、参照光の位相をずらしながら複数のホログラムを測定する必要があるため、高速測定が難しいという問題がある。そこで本研究では、高解像度と高速測定を両立可能な並列位相シフト法に基づいたODT光学系を構築した。並列位相シフトODTでは、1/2波長板と1/4波長板を用いて位相がπ/2ずつずれた4つのホログラムを生成し、偏光イメージングカメラにより各々を分離して同時取得することで、測定時間を大幅に短縮できる。
検証実験では珪藻をサンプルとして用いた測定を行った。面内方向の再構成はおおむねイメージセンサの解像度から期待できる分解能を得られた。一方、使用した対物レンズの開口数(NA)が小さかったため、サンプルに対するビーム入射角が浅く、光軸方向の分解能は面内方向と比較すると改善すべき余地が認められた。サンプルの光軸方向の周波数成分を測定するためにはビーム入射角を大きくする必要があるため、今後は高NAの対物レンズを光学系に組み込んで実験を進める。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究2年目である2023年度は主として実験による検証に取り組んだ。物体の複素振幅分布の測定手法として並列位相シフトディジタルホログラフィ(DH)を採用した。並列位相シフト光学系では、1/2波長板と1/4波長板を用いて位相がπ/2ずつずれた4つのホログラムを生成し、偏光イメージングカメラにより各々を分離して同時取得することで、短時間で解像度の高い複素振幅分布を測定可能である。本研究では、上記の並列位相シフト光学系に空間光変調器(SLM)を組み込んだトモグラフィ光学系を構築した。SLMを用いることで、機械的動作を伴うことなく、サンプルに対するビームの入射角を変えることができる。
実験では珪藻をサンプルとして用いた測定を行った。SLMを組み込んだ並列位相シフト光学系により測定した複素振幅分布から屈折率分布を再構成した。本実験により得られた屈折率分布から、面内方向に対して光軸方向の分解能が不足していることが確認できた。実験で用いた対物レンズの開口数(NA)が比較的低いため、資料に対するビームの入射角度が浅く、光軸方向の周波数成分を取得できなかったことが原因としてあげられる。次年度は高NAの対物レンズを導入して、光軸方向の分解能を向上させる予定である。

Strategy for Future Research Activity

今後の研究では、トモグラフィ光学系に高開口数(NA)の対物レンズを組み込み、より実用的な光回折トモグラフィ(ODT)システムの構築を図る。あわせて、多重散乱モデルに基づいた実用的な再構成ソフトウェアを開発する。
現在構築している光学系では、波長板と偏光イメージングカメラを利用した並列位相シフト法により短時間で物体光波を測定することができる。一方で対物レンズのNAが低いためサンプルに対するビームの入射角が浅く、光軸方向の分解能には改善の余地が認められる。今後は高NAの対物レンズを光学系に組み込むことで、ビーム入射角を拡大し、光軸方向の分解能を改善する。
また、将来的な公開を視野に入れて、ODTのための実用的なソフトウェアの開発を進める。

Report

(2 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2023 2022

All Journal Article (5 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Numerical Investigation of Optical Diffraction Tomography using Iterative Methods Considering Constraint Condition2023

    • Author(s)
      Tomoaki Komatsu, Shuhei Yoshida
    • Journal Title

      Technical Digest of International Symposium on Imaging, Sensing, and Optical Memory 2023

      Volume: 2023 Pages: 85-86

    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Journal Article] 制約条件を考慮した反復法による光回折トモグラフィーの検討2023

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Journal Title

      第84回応用物理学会秋季学術講演会 講演予稿集

      Volume: 2023

    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Journal Article] 単一画素検出器による波面計測の検討2023

    • Author(s)
      吉田周平
    • Journal Title

      電子情報通信学会技術研究報告

      Volume: 123 Pages: 46-49

    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Journal Article] 修正ボルン級数に基づいた多重散乱の数値モデルの検討2023

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Journal Title

      第70回応用物理学会春期学術講演会 講演予稿集

      Volume: 70

    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Journal Article] 光回折トモグラフィによる三次元屈折率分布の定量測定の検討2022

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Journal Title

      第83回応用物理学会秋季学術講演会 講演予稿集

      Volume: 83

    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] ディジタルホログラフィによる波面計測とトモグラフィ応用2023

    • Author(s)
      吉田周平
    • Organizer
      日本オプトメカトロニクス協会光センシング技術部会講演会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] Numerical Investigation of Optical Diffraction Tomography using Iterative Methods Considering Constraint Condition2023

    • Author(s)
      Tomoaki Komatsu, Shuhei Yoshida
    • Organizer
      International Symposium on Imaging, Sensing, and Optical Memory 2023
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 制約条件を考慮した反復法による光回折トモグラフィーの検討2023

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Organizer
      第84回応用物理学会秋季学術講演会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 単一画素検出器による波面計測の検討2023

    • Author(s)
      吉田周平
    • Organizer
      磁気記録・情報ストレージ研究会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 修正ボルン級数に基づいた多重散乱の数値モデルの検討2023

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Organizer
      第70回応用物理学会春期学術講演会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 光回折トモグラフィによる三次元屈折率分布の定量測定の検討2022

    • Author(s)
      小松智昭,吉田周平
    • Organizer
      第83回応用物理学会秋季学術講演会
    • Related Report
      2022 Research-status Report

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Published: 2022-04-19   Modified: 2024-12-25  

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