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Biological characterization of scorpion alpha/beta toxin like peptides in Japanese forest green tree frog

Research Project

Project/Area Number 22K05567
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 38060:Applied molecular and cellular biology-related
Research InstitutionNational Institute of Advanced Industrial Science and Technology

Principal Investigator

稲垣 英利  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 生命工学領域, 主任研究員 (90344126)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 宮下 正弘  京都大学, 農学研究科, 准教授 (80324664)
茂里 康  和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (90357187)
Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywordsモリアオガエル / 泡巣構成ペプチド / OTLP / 泡巣 / ペプチド / イオンチャネル
Outline of Research at the Start

日本の固有種であるモリアオガエル(Zhangixalus arboreus)の泡巣構成成分として、我々はHylaserpin S2とよばれるアンナンツリーフロッグ(Hyla simplex)の皮膚から同定されたプロテアーゼ・インヒビターと相同性を示す4種類のペプチド(OTLP: Oviduct Toxin-Like Peptide 1, 2, 3, 4)を発見した。本研究では、OTLPが神経毒かプロテアーゼ・インヒビターかを、電気生理学的方法とプロテアーゼ・アッセイで検証する。同時に、ミールワームなどに投与し、 OTLPの選択的毒性とOTLPが泡巣に含まれることの生物学的意義を解明する。

Outline of Annual Research Achievements

今年度は、引き続き、組換え技術及び化学合成でモリアオガエル泡巣の構成ペプチドOTLP(Oviduct Toxin-Like Peptide)の取得を試みた。これまで大腸菌による組換えOTLPの発現・精製が困難であったため、Pichia酵母でのによる組換えOTLPの発現・精製を試みているが、これまでのところ十分量の組換えOTLPの取得にいたっていない。また、化学合成については、OTLP1の合成の再検討を行うとともに、OLTP2-4の化学合成の検討に着手した。
同時に、組替え技術と化学合成によるOLTPペプチドの取得に手間取っていることから、モリアオガエル泡巣から直接、ペプチドを大量に精製することにも着手した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初の計画では、今年度にはOTLPペプチドを取得する予定であったが、組換え技術及び化学合成でモリアオガエル泡巣の構成ペプチドOTLP(Oviduct Toxin-Like Peptide)の取得が完了しておらず、生理活性の確認段階に進んでいない。全体的に計画に比べて本プロジェクトは遅れている。

Strategy for Future Research Activity

早急に、組換え技術及び化学合成でモリアオガエル泡巣の構成ペプチドOTLPの組換え体を取得し、この組換え体によりミルワームを用いた殺虫活性の確認を行った後、電気生理によるイオンチャネル阻害活性、プロテアーゼ阻害活性などを測定したいと考えている。

Report

(2 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • Research Products

    (3 results)

All 2024 2023

All Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 1 results)

  • [Journal Article] 泡と消えない」カエル泡巣のはなし2024

    • Author(s)
      稲垣英利, 絹見朋也, 原本悦和, 茂里康
    • Journal Title

      化学と生物

      Volume: 3 Pages: 106-108

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Real-time tilting and twisting motions of ligand-bound states of α7 nicotinic acetylcholine receptor2024

    • Author(s)
      Yang Yue、Arai Tatsuya、Sasaki Daisuke、Kuramochi Masahiro、Inagaki Hidetoshi、Ohashi Sumiko、Sekiguchi Hiroshi、Mio Kazuhiro、Kubo Tai、Sasaki Yuji C.
    • Journal Title

      European Biophysics Journal

      Volume: 53 Issue: 1-2 Pages: 15-25

    • DOI

      10.1007/s00249-023-01693-6

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] カエル泡巣タンパク質の探索と機能2023

    • Author(s)
      絹見朋也, 原本悦和, 稲垣英利, 茂里康
    • Journal Title

      J. Mass Spectrom. Soc. Jpn.

      Volume: 71

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed

URL: 

Published: 2022-04-19   Modified: 2024-12-25  

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