Project/Area Number |
22K05840
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 40040:Aquatic life science-related
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Research Institution | Fisheries Research and Education Agency |
Principal Investigator |
湯浅 光貴 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(廿日市), 任期付研究員 (00898984)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
紫加田 知幸 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(長崎), 主任研究員 (40603048)
内田 肇 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(長崎), 研究員 (50805132)
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Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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Keywords | 有害赤潮 / 魚毒性 / アレキサンドリウム |
Outline of Research at the Start |
海産渦鞭毛藻アレキサンドリウム属は、麻痺性貝毒の原因生物として世界中で広く認知されている。また、一部の種は魚毒性を有することが知られており、近年、国内では本属の高密度化(赤潮)による魚類養殖業に被害が発生している。被害軽減のための対策を講じる上で、本属の魚毒性について情報を蓄積することが喫緊の課題である。最近、申請者らは、魚毒物質が特定されていない他の有害微細藻とは異なり、本属の魚毒物質は活性を維持したまま凍結保存可能で、熱にも耐える性質を有し、化学的に極めて安定な化合物であることを見出した。そこで本研究では、最先端の分析化学的アプローチにより、アレキサンドリウム属の魚毒物質を特定する。
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Outline of Annual Research Achievements |
有害赤潮原因プランクトンAlexandrium leeiの魚毒成分を特定するために、令和4年度は、液液分配や固相抽出による毒成分の化学的な極性の把握と適切な分画精製法の検討を行った。A. leeiの凍結融解液を水とジエチルエーテル、次に乾固したジエチルエーテル画分を、メタノールとヘキサンで液-液分配した。各画分の有機溶媒を除去し、ヒメダカに暴露した結果、水層に凍結融解液と同等の毒性が確認され、ジエチルエーテル層およびヘキサン層、メタノール層に毒性は確認されなかった。次に、A. leeiの凍結融解液を疎水性物質を吸着する合成吸着樹脂に通して含水メタノールで分画した。試料を乾固した後、滅菌海水に希釈した分画液をヒメダカおよびブリ稚魚に暴露し、有毒画分を確認した。次に合成吸着樹脂の有毒画分をオクタデシルシリル化(ODS)シリカゲル担体に通して含水メタノールで分画し乾固した後、滅菌海水へ希釈した試料をヒメダカへ暴露した結果、一部の分画液でヒメダカへの強い毒性を確認した。 以上により、A. leeiの有する魚毒成分を液液分配やクロマトグラフィーで分画精製できることを確認し、適切な担体を選定することができた。また、ヒメダカだけでなくブリでも同様の分画液でへい死が確認されたことから、養殖対象魚に対する魚毒成分を検出できていると考えられる。さらに、液液分配およびクロマトグラフィーによる分画の結果からA. leeiの魚毒成分は両親媒性の化合物である可能性が示唆された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画通り、液液分配による魚毒性物質の極性の把握し、適切な固相抽出担体を選択することができた。また、固相抽出によって安定的に魚毒含有画分を分画することができているため、おおむね順調に進展していると考える。
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Strategy for Future Research Activity |
令和5年度は固相抽出によって分画したA. leeiの魚毒含有画分を高速液体クロマトグラフィーに供して更なる分画精製を行い、得られた分画液をヒメダカ等へ暴露して、魚毒含有画分を特定する。また、物質特定を見据えた分画精製には、初発の培養液が大量に必要になるため、A. leeiの10 L規模の大量培養系の構築を目指す。
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Report
(1 results)
Research Products
(1 results)