細胞の生死を制御するミトコンドリアと原形質膜のクロストーク機構の解明
Project/Area Number |
22K06827
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 48020:Physiology-related
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Research Institution | University of Toyama |
Principal Investigator |
清水 貴浩 富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 准教授 (40353437)
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Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | チャネル / ミトコンドリア / 蛋白質間相互作用 / イオンチャネル / 原形質膜 |
Outline of Research at the Start |
近年、様々な細胞機能の制御において、ミトコンドリアの動態や他の器官との機能連関が着目されてきているが、原形質膜とミトコンドリアの近接機構については知られていない。本研究では、原形質膜とミトコンドリア外膜に局在する蛋白質間相互作用が細胞の生死に関わるイオンチャネル機能を制御するメカニズムを解明するとともに、病態における原形質膜とミトコンドリアのクロストークの役割について明らかにする。
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Outline of Annual Research Achievements |
容積感受性外向き整流性アニオンチャネル (VSOR) は、細胞の生死を制御するイオンチャネルである。これまでの予備的実験において、ミトコンドリアに発現しているswelling-sensitive molecule A (SSM-A:仮称) の発現量とVSOR機能が正の相関を示すだけでなく、VSORの機能発現における必須構成分子であり、原形質膜に発現しているleucine-rich repeat-containing 8A (LRRC8A) とSSM-Aとの近接がVSOR機能に必須であることを見出していることから、本年度は、これらの蛋白質間相互作用によるVSOR機能の制御機構について解明することを目的とした。 まず、VSORの機能制御に必要なSSM-A領域を明らかにするため、VSOR活性に影響しない他のSSMアイソフォームとのキメラ体を作製した。いくつかのSSM-AのN末端キメラ体を過剰発現したヒト胎児腎臓HEK293T細胞では、VSOR電流のSSM-Aによる亢進が見られなくなった。また近接ライゲーションアッセイ法によりLRRC8AとSSM-Aとの近接を検討した結果、これらのSSM-Aキメラ体はLRRC8Aとの近接を示さなかった。一方、LRRC8AのC末端にあるleucine-rich repeat 領域を欠損させた変異体を作製したが、欠損変異体の発現が見られなかった。このため、leucine-rich repeat 領域の変異体を作製し、SSM-Aと相互作用するLRRC8Aの領域の検討を進めている。以上の結果から、VSORの機能制御にはSSM-AのN末端とLRRC8Aとの近接が重要であることが示唆された。本研究結果により、原形質膜とミトコンドリアのクロストーク機構に必須となる蛋白質間相互作用について明らかにできた。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度の研究において、VSORの機能に影響を与える原形質膜とミトコンドリアの蛋白質間相互作用メカニズムを明らかにできた。研究計画は着実に進行しており、成果も順調に得られている。
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Strategy for Future Research Activity |
今後は、原形質膜とミトコンドリアのクロストーク機構についてより詳細に明らかにするため、ミトコンドリアの局在および動態のVSOR機能に対する影響について検討を進めていく予定である。
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Report
(1 results)
Research Products
(8 results)