Analysis of the mechanisms of metastasis of lung adenocarcinoma by low-attachment spheroid culture
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22K06945
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 49020:Human pathology-related
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
仁木 利郎 自治医科大学, 医学部, 教授 (90198424)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
天野 雄介 自治医科大学, 医学部, 准教授 (70571587)
松原 大祐 筑波大学, 医学医療系, 教授 (80415554)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000)
Fiscal Year 2024: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
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| Keywords | 肺腺癌 / スフェロイド / 転移 |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では，まず，1) メタボローム解析， 2) トランスクリプトーム解析により，低接着状態にある癌細胞の特性を明らかにし，標的となる代謝経路，シグナル伝達分子を選出する．次いで，A)in vitroでの阻害実験, ノックダウン実験による検証, B)肺癌組織での発現解析による検証を行い，最終的には，in vivoの転移モデルでの阻害実験, ノックダウン実験により，“潜伏状態”にある転移初期の癌細胞に対する治療標的分子を同定したいと考えている．
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| Outline of Annual Research Achievements |
肺癌の術後再発率は70-80％と高く，その多くは遠隔転移による．転移が臨床的に顕在化するまでの期間，癌細胞は増殖を休止した“休眠状態”(dormancy)あるいは“潜伏状態”(latency)にあり，その根絶を困難にしている．腫瘍本体から遊離した低接着性の癌細胞は，転移に至る過程で，接着状態とは異なる代謝経路やシグナル伝達経路を活性化することにより，低接着環境下のストレスに適応していると考えられる．本研究では、その分子機構を低接着培養を用いた系にて解析したいと考えている．
まず肺腺癌の主たるドライバー変異から構成される肺腺癌細胞6株 (A549, H441, H2009, HCC4006, LC-2/ad, H2228)を低接着培養系で培養した．(A)通常の接着培養、(B)低接着の初期（低接着培養開始後1日），(C)安定期（低接着培養開始後7日）の時点でサンプルを調整し、メタボローム解析、遺伝子発現解析を行った．現在、そのデータを解析中である．
次に、RNAi, 薬理学的阻害剤による解析と検証を行うため、代謝阻害，シグナル伝達の阻害，あるいはRNAi (shRNA, siRNA)による遺伝子発現の抑制を行い，細胞の生存・増殖に与える効果を検証する実験系を立ち上げた．いままでの検討結果にて、概して低接着培養下では薬剤感受性が低下する傾向を認めている．なかでも低接着条件でも細胞増殖抑制を示す薬剤をいくつか同定している．今後、メタボローム解析、遺伝子発現解析のデータとあわせて候補分子の絞り込みを行う予定である．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
メタボローム解析、遺伝子発現解析のデータ取得は予定どおり終了している。RNAi, 薬理学的阻害剤による解析もすでに開始しており、順調に進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
メタボローム解析、遺伝子発現解析のデータをもとに、どのような遺伝子群、パスウェイが低接着培養での生存、増殖に関わっているのか、検討を進める予定である。その結果をみつつ、RNAi, 薬理学的阻害剤による解析もあわせて継続する予定である。
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Report
(1 results)
Research Products
(3 results)
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[Journal Article] Genetic and phenotypic determinants of morphologies in 3D cultures and xenografts of lung tumor cell lines.2023
Author(s)
Matsubara D, Yoshimoto T, Akolekar N, Totsuka T, Amano Y, Kihara A, Miura T, Isagawa Y, Sakuma Y, Ishikawa S, Ushiku T, Fukayama M, Niki T.
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Journal Title
Cancer Science
Volume: -
Issue: 4
Pages: 1757-1770
DOI
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Peer Reviewed / Open Access
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