難治がんに有望ながん免疫effector T細胞特性の基盤的解明と細胞治療開発
| Project/Area Number |
22K07251
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Review Section |
Basic Section 50020:Tumor diagnostics and therapeutics-related
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
西田 純幸 大阪大学, 大学院医学系研究科, 特任教授(常勤) (00403189)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森本 創世子 大阪大学, 大学院医学系研究科, 寄附講座助教 (10649023)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
|
| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
|
|---|
| Keywords | WT1 / CTL / high-avidity TCR / がん免疫療法 / 細胞傷害性T細胞 / 膵臓がん / がんワクチン |
|---|
| Outline of Research at the Start |
我々は、臨床試験を通して、汎腫瘍抗原WT1を標的としたがんペプチドワクチンと抗がん剤との併用治療の相加効果が進行膵臓癌患者の予後を改善することを報告した。今回の研究では、本治療法のeffectorとなるWT1抗原特異的細胞傷害性T細胞（WT1-CTL)に注目し、遺伝子発現やＴ細胞受容体（TCR）クローナリティーについて経時的な解析を通して有効例と効果不十分例の間でWT1-CTLの機能的・質的な違いを明確にする。更に有効例のサンプルからWT1-CTLクローンを樹立し、そのHLA拘束性ペプチド特異的TCRの単離とその機能解析を行い、遺伝子改変養子免疫療法への応用につながるような基盤的研究を行う。
|
| Outline of Annual Research Achievements |
進行膵臓癌患者を対象に実施したゲムシタビン（GEM）併用WT1ペプチドワクチン療法の臨床試験で採取した血液臨床検体の末梢血単核細胞（PBMCs）から、high-avidity T細胞受容体（TCR）を単離することを目的として実験を遂行した。
最初に、HLA-A*02:01陽性進行膵癌患者17例（治療別－GEM + WT1ワクチン：8例／GEM単独：9例）のPBMCsから HLA-A*02:01拘束性WT1ペプチド WT1-126ペプチド（WT1-126）に特異的なTCRを有する細胞傷害性T細胞（CTL）を単離した。low-avidity TCRを持つ細胞を増殖させないために、PBMCsを低濃度（10 ng/μL)のWT1-126で刺激しながら1週間培養しCTLを増幅してWT1-126 tetramer陽性細胞(WT1-126-CTLs)をsingle cell sortingした。結果、全体として46個のWT1-126-CTLsクローンの増殖を認めた。WT1ペプチドワクチンを受けた患者由来のPBMCs(8例中7例で誘導可能だった)から主としてこれらのWT1-126-CTLsを得た。次に、樹立したWT1-126-CTLs の46クローンそれぞれの機能評価を目的にWT1-126ペプチド反応性をサイトカイン（IFN-gamma）産生能で評価した。高濃度WT1-126（1000 ng/μL）刺激では全クローンでIFN-gamma産生を認めたが、その中に低濃度WT1-126（10 ng/μL）刺激下においても高いサイトカイン産生能を発揮する5クローンを同定した。更にこれら5クローンのTCRα鎖およびβ鎖のCDR3配列を解析したところ、2クローンは同じCDR3を有しており、同一クローンであることが分かった。
現在は得られた4クローン由来TCRを2D3細胞（TCRシグナルの活性化を、GFP発現を指標として評価できるNFAT-GFPレポーター細胞）に導入し、導入TCRの細胞表面発現ならびに、WT1ペプチド濃度依存的GFP発現を評価している。今後、TCRをヒトT細胞に発現させ、細胞傷害活性およびサイトカイン産生能などを評価することで、臨床に使用できるようなWT1特異的TCRであることを示す。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
すでに作製済みの2D3細胞（NFAT-GFPレポーター細胞）を用いたため、TCRのavidityをスムーズに評価できた。
|
| Strategy for Future Research Activity |
単離した4クローン由来TCRをヒトT細胞に発現させ、細胞傷害活性・サイトカイン産生能などを評価して、臨床に使用できるようなhigh-avidity TCRであることを示す。
|
Report
(1 results)
Research Products
(4 results)
-
-
[Journal Article] WT1 Trio Peptide-Based Cancer Vaccine for Rare Cancers Expressing Shared Target WT12023
Author(s)
Oji Y, Kagawa N, Arita H, Naka N, Hamada KI, Outani H, Shintani Y, Takeda Y, Morii E, Shimazu K, Suzuki M, Nishida S, Nakata J, Tsuboi A, Iwai M, Hayashi S, Imanishi R, Ikejima S, Kanegae M, Iwamoto M, Ikeda M, Yagi K, Shimokado H, Nakajima H, Hasegawa K, Morimoto S, Fujiki F 他
-
Journal Title
Cancers
Volume: 15
Issue: 2
Pages: 393-393
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
-
-
