POU1F1 βアイソフォーム異常にもとづく先天性下垂体機能低下症の疾患概念確立

• Project/Area Number: 22K07859
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
• Research Institution: National Center for Child Health and Development
• Principal Investigator: 秋葉 和壽 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 分子内分泌研究部, 研究員 (10649974)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2024: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000); Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: POU1F1 / 下垂体 / 転写調節因子 / アイソフォーム / 成長 / 成長ホルモン / 遺伝

Outline of Research at the Start

本研究では①先天性複合型下垂体機能低下症患者80名における深部イントロン変異の探索　②培養細胞系でのマルチオミクス解析　③アイソフォーム特異的改変マウスの比較解析　の３点から「POU1F1βアイソフォーム異常にもとづく先天性複合型下垂体機能低下症」の疾患概念確立を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明、2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明 の2点である

1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明: 2023年度は代表研究者の所属する研究室に依頼のあった成長ホルモン分泌不全症疑い患者のうち、 原因が同定されていない症例のDNA検体を用いて該当領域のバリアントの有無を確認した。結果はバリアント陽性検体は0であった。

2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明: 2023年度は2022年度に樹立したPOU1F1α-TurboID, POU1F1β-TurboID、POU1F1のエクソン2を欠失させたPOU1F1ΔEx2-TurboID、核内以降シグナル(NLS)をTurboIDに結合したTurboID-NLS融合タンパク質を発現するHeLa細胞株を用いて近接ラベリング解析を行った。解析の結果、転写活性化ドメインを喪失するPOU1F1ΔEx2では転写共役因子の全般的なリクルートの低下、POU1F1βでは転写共役因子のうち抑制因子のリクルートの上昇を認めた。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

2023年度はPOU1F1βドメインの役割を解明する上で重要な結果を出すことができている。

Strategy for Future Research Activity

2023年度の結果からβドメインの役割が抑制型の転写調節因子のリクルートであると推測した。2024年度は引き続きその検証実験を行う。また、引き続き臨床検体の解析を行う。