Ph＋ALL細胞におけるSIRT1が誘導するABL1変異獲得の機序の解明

Research Project

Project/Area Number	22K07918
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
Research Institution	Kagoshima University
Principal Investigator	児玉祐一鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (20535695)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岡本康裕鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (30398002) 中川俊輔鹿児島大学, 鹿児島大学病院, 医員 (60789973) 西川拓朗鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 講師 (90535725)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000) Fiscal Year 2024: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000) Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Keywords	Ph+ALL / SIRT1 / ABL1変異
Outline of Research at the Start	小児Philadelphia染色体陽性急性リンパ性白血病（Ph+ALL）の治療として、チロシンキナーゼ阻害剤（TKI）を併用した化学療法が確立しているが、ABL1遺伝子の変異によるTKIの耐性化が問題である。SIRT1はDNAミスマッチ修復（MMR）遺伝子群を抑制し遺伝子変異を誘導する。我々はABL1変異を獲得し再発したPh＋ALL細胞で、SIRT1の発現量が亢進していたことを明らかにした。本研究では①TKIがSIRT1発現亢進をもたらすこと②SIRT1がMMR遺伝子群を抑制しABL1変異をもたらすこと③SIRT1阻害剤がABL1変異獲得の予防に有用であることを明らかにする。
Outline of Annual Research Achievements	Ph＋ALL細胞株（PALL2）のチロシンキナーゼ阻害薬（TKI）への耐性化 #1．イマチニブ耐性株の作成：PALL2をイマチニブ、イマチニブメシル酸を低濃度から徐々に濃度を上昇させて培養した。イマチニブでは10,000nＭまでの耐性株、イマチニブメシル酸では25,000nＭまでの耐性株が作成された。ＭＴＴ assayでそれぞれの耐性株は、薬剤耐性であることを確認した。＃2．ABL1変異解析：イマチニブ耐性株では1,000nM耐性株までは変異を認めなかったが、2,500nM以上の耐性株ではT315I変異とＤ267Ｇ変異が獲得されていた。イマチニブメシル酸耐性株では10μＭ耐性株、25μＭ耐性株の両者においてABL1変異の獲得はなかった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason ABL1変異株が完成するまでに時間を要した。今回作成されたABL1変異株を利用することで、解析を進めることができる。
Strategy for Future Research Activity	イマチニブ耐性でT315Iを有する株を用いて、遺伝子発現、蛋白発現を解析し、さらにはSIRT1を強発現させることで、ABL1変異を有しやすくなるか、SIRT1の発現を抑えることで、ABL1変異の誘導を抑制できるかを評価する。