炎症性肝発癌過程におけるDNA脱メチル化酵素の機能的役割と分子機序の解明

Research Project

Project/Area Number	22K07983
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 53010:Gastroenterology-related
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	高井淳京都大学, 医学研究科, 助教 (80760587)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000) Fiscal Year 2024: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000) Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Keywords	脂肪肝炎 / DNA脱メチル化 / 肝癌 / 肝細胞癌
Outline of Research at the Start	本研究では、肝細胞特異的にTet1, Tet2を欠損させたマウスにウイルス性肝炎を模倣した炎症刺激および脂肪性肝炎刺激を加え、表現型の解析および肝組織のトランスクリプトーム解析・DNAメチル化解析を網羅的に行う。また、ウイルス性肝炎・脂肪性肝炎を背景とした肝発癌症例および非肝発癌症例の背景肝組織を採取し、網羅的解析を施行したうえで、マウスのデータと統合し、肝発癌に関わるエピゲノム変化と分子発現異常を同定する。
Outline of Annual Research Achievements	Tet1-floxedマウス、Tet2-floxedマウスとAlb-Creマウスとの交配を継続し、肝細胞特異的にTet1, Tet2およびその両者を欠損させたマウス(Alb-Tet1-/-, Alb-Tet2-/-, Alb-Tet1-/-2-/-)の個体数を増やした。昨年度の検討では、これらのマウスに生後6週より高脂肪食を16週肝投与するとTet2-/-群で脂肪肝が有意に悪化することが明らかとなっていたが、本年度は高脂肪食に加えて0.02%thioacetamideを経口投与させることにより、肝内における炎症の誘導を行った。その結果、コントロール群に比べるとTet1-/-, Tet2-/-群で、特にTet2-/-群において強い脂肪肝および炎症・線維化の進行が認められた。また、およそ10例(昨年度と合わせて20例)の非アルコール性脂肪肝を背景とした肝癌症例の切除検体から癌部と非癌部組織を複数個採取し、網羅的解析目的で凍結保存した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 各種遺伝子改変マウスおよび肝炎刺激実験は順調に進んでいる。また、臨床検体の収集も順調に進んでいる。
Strategy for Future Research Activity	動物実験については、現在の遺伝子型で各群に分け、炎症・線維化・発癌の表現型について解析を行う。臨床検体の採取も本年度と同様に進めて、トランスクリプトーム解析およびDNAメチル化解析を行う。