NotchリガンドDll1による動脈硬化プラーク不安定化機構の解明と新規治療開発

Research Project

Project/Area Number	22K08158
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 53020:Cardiology-related
Research Institution	University of Occupational and Environmental Health, Japan
Principal Investigator	古賀純一郎産業医科大学, 医学部, 助教 (10746142)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000) Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000) Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000) Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Keywords	動脈硬化 / マクロファージ / Notch / ドラッグデリバリーシステム
Outline of Research at the Start	動脈硬化プラークの不安定化は心筋梗塞に代表される急性血栓性合併症の発症基盤となることが知られているが、プラーク不安定化の分子機序は未だ不明な点が多い。本研究ではNotchリガンドDelta-like ligand 1 (Dll1)が動脈硬化病変の不安定化において果たす役割を明らかにし、新規治療標的としての可能性を検証する。
Outline of Annual Research Achievements	令和4年度はDll1機能阻害が動脈硬化不安定化に及ぼす作用を明らかにするためApoE欠損マウスを用い長期高脂肪食負荷モデルを作成した。8週齢より高脂肪食を開始し、20週齢よりDll1阻害抗体もしくは対照のIgGを週2回投与し、32週齢時に大動脈を摘出、病理組織学的評価を行った。現時点ではDll1機能阻害によりプラーク内コラーゲン含量の増加などプラーク不安定化が抑制されたことを示唆する結果を得られており次年度、サンプル数を上乗せしデータの信頼性を確保する。培養マクロファージを用いた実験ではDll1により炎症性マクロファージへの分化が促進されることを示唆する結果を得ており、現在、その細胞内シグナルについて解析中である。特にDll1-Notch下流の古典的経路、非古典的経路に着目し、これまで詳細が不明であったDll1によるマクロファージ活性化機構の詳細を明らかにすべく検討を行っている。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 令和4年度はApoE欠損マウスにおいてDll1機能阻害がプラーク不安定化に及ぼす影響を明らかにすることを主目的としており、サンプル数を今後、上乗せする予定であるが、初期の結果は得られている。また、培養マクロファージを用いた系についてはDll1-Notch以下の分子メカニズム解析を行っており順調に進展している。
Strategy for Future Research Activity	令和5年度は当初計画通りDll1によるマクロファージ機能制御機構の詳細を明らかにすることを試みる。動脈硬化を来した血管のRNA-seqを行い、Dll1がどの様な細胞内シグナルに影響を及ぼすかを明らかにするとともに、マクロファージの時空間的動態解析を行い動脈硬化プラークにおけるマクロファージの動態について検証する。