| Project/Area Number |
22K08385
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 53050:Dermatology-related
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
東 裕子 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (00381179)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山口 宗一 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (20325814)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 好中球 / マイクロＲＮＡ / 乾癬 / ケラチノサイト / miRNA / 好中球性皮膚症 / 低密度好中球 |
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| Outline of Research at the Start |
好中球性皮膚症は、無菌性に活性化された好中球が皮膚に浸潤してくる疾患群である。好中球サブセットとして着目されている低密度好中球（ＬＤＮ）が、好中球性皮膚症の病態に果たす役割について明らかにする。LDN を中心に、周囲をとりまくマクロファージや免疫細胞や表皮細胞、血管内皮細胞、線維芽細胞など多種多様な細胞群が、どのように相互に影響を及ぼし、どのような病態を形成しているかを解明する。また、介在している microRNA とエクソソームに着目し、これらが病勢マーカーや治療ターゲットとなりうるのか、検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
乾癬患者血清による miRNA 網羅解析から得られた、疾患で上昇しているmiRNAの一群の中で、特に発現量の変化が大きかったmiR-7641について検討した。real time RT-PCRを用いて乾癬患者での発現を測定したところ、コントロール群に比較して有意に高値を呈していた。ケラチノサイトと好中球、単球でmiR-7641の発現量を比較したところ、ケラチノサイトでより多く発現し、ＴＮＦα刺激によってその発現が増強することがわかった。初代培養ケラチノサイトでmiR-7641を強発現させると、有意に細胞増殖が亢進した。また、miR-7641 inhibitorでその細胞内発現を低下させると細胞増殖は抑制された。miR-7641はケラチノサイトの増殖を誘導した。以上から、miR-7641は乾癬の病態形成に関与していることが示唆された。さらにそのメカニズムの探索を行う予定である。
好中球サブセット、低密度好中球（LDN）が炎症や癌で増加することが知られているが、密度勾配遠心法によるLDNの分離では定量的に測定することが困難である。PrimeFlow RNA アッセイを用いることで、好中球中のLDNの割合を測定することが可能になった。全血から抽出した好中球に、LDNのみに発現していたいくつかのmiRNAをターゲットとしたプローブを結合させ、シグナルを増幅後に蛍光色素で標識し、好中球の表面マーカーの抗CD18抗体との二重染色によりフローサイトメトリーで解析した。現在、好中球性皮膚症の患者で測定中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
低密度好中球の新たな測定方法を見つけだし、疾患患者で測定、検討できていることから判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
好中球性皮膚症の患者でのLDNの解析を進め、LDNの割合が増加する疾患を探っていく。好中球でmiR-Aの発現に関わる免疫系の微小環境について検討していく予定である。
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