| Project/Area Number |
22K08456
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 54010:Hematology and medical oncology-related
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
高橋 尚史 熊本大学, ヒトレトロウイルス学共同研究センター, 助教 (70711000)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | マクロファージ |
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| Outline of Research at the Start |
マクロファージ（Mφ）は末梢単球から分化して全身組織に分布すると言われてきた。ところが最近、成体組織には単球由来Mφに加え、胎生期に発生したいわゆる原始Mφも多く残っていることが分かってきた。この発見は、原始Mφが長期に増殖し続けている可能性も示唆する。しかし、原始Mφの実態や単球由来Mφとの機能的相違などの多くは未解明である。そこで本研究では、マウス胎生期由来（卵黄嚢と胎児肝）について、増殖能力やそれを規定するメカニズムなどを同定する。さらにこの原始Mφが成人ヒト組織中にも存在することを実証する。以上により、起源と増殖能が異なるMφが組織の中で混在することの意義の解明を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
成体の多くの組織には、骨髄の幹細胞から分化した単球由来マクロファージに加え、卵黄嚢や胎児肝由来マクロファージが存在する事実が明らかとなり、その意義に注目が集まっているが未だ不明の部分が多い。これら異なる由来を持つマウスマクロファージをex vivoで増幅培養し、それらの特性を比較解析している。
本年度も引き続きこの自己増殖型マクロファージの特性の比較解析を行い、胎児肝由来マクロファージ(FL)のLPS反応性は卵黄嚢由来(YS)や骨髄由来(BM)のものより高いことを見出した。これはマウス胎児初代細胞を用いた解析でも類似の報告(Lakhdari, Sci Rep, 2019)があり、改めて胎児期由来マクロファージモデルとしての特性と妥当性を示した。
YSとFLマクロファージはM-CSF非存在下の培養で、BMと比べてアポトーシス誘導が起こりにくく、特にYSは他の2種類と比べてM-CSFやIL-34の自己分泌レベルも低いことを示唆する結果も得た。さらにYSとFLマクロファージはスタウロスポリンなどアポトーシス誘導薬剤を加えても細胞死誘導がされにくいことがわかった。前年度のRNA-seqおよび今年度新たに追加したATAC-seqのデータからも、YSとFLではBMと比較してアポトーシス関連遺伝子転写レベルが低いという結果を得た。つまり、胎児期由来マクロファージは増殖能や生存能が骨髄由来マクロファージよりも高く、M-CSF低依存性やアポトーシス誘導のされにくさがそれに関連していることが示唆された。
また、ヒト腹水マクロファージについては、胎児期由来と推定される分画(HLA-DRhighCCR2low)と骨髄由来分画(HLA-DRlowCCR2high)をソーティング後、RNA-seqによる遺伝子発現の差を解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の課題の一つであるマウス胎児期由来マクロファージ解析において、アポトーシス関連の特性に関する一定の成果を得られており、順調に進行している。また、もう一つの課題のヒト腹水マクロファージの解析にも着手できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
マウスマクロファージについては、引き続き増殖関連遺伝子の特性解析を進めていくとともに、マウスへのin vivo移植で定着・増殖が見られるかを評価する。また、ヒト由来腹水マクロファージについてもRNA-seqの解析を進め、骨髄由来・胎児期由来の２つの分画の特性の違いについて比較解析を進めていく予定である。
これらの成果を次年度に論文としてまとめることを目指す。
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