HTLV-1水平感染者で誘導されるEnv特異的抗体の性状解析
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22K08594
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 54030:Infectious disease medicine-related
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
手塚 健太 国立感染症研究所, 次世代生物学的製剤研究センター, 主任研究官 (10754533)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | HTLV-1水平感染者 / 抗原特異的記憶B細胞 / モノクローナル中和抗体 / HTLV-1 Env蛋白質gp46 / HTLV-1感染 / 中和抗体 / 水平感染 / モノクローナル抗体 |
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| Outline of Research at the Start |
HTLV-1感染症の新しい予防・治療戦略が望まれている。申請者らの疫学研究によって得られた「水平感染後に感染者に誘導されるHTLV-1 Env蛋白質gp46 197-216AAを認識する抗体が、生体内プロウイルス量の抑制活性を持つ」という知見に基づき、感染者由来のモノクローナル抗体の医薬品化を目指す。HTLV-1水平感染者の抗原特異的記憶B細胞を単離し、分化増殖させることにより目的とする抗体を産生する形質細胞をクローン化し、抗体タンパク質の大量産生と性状解析を実施する。本精製モノクローナル抗体医薬が実用化すれば、関連疾患発症の抑制、母児感染対策等において有用性が期待できる。
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| Outline of Annual Research Achievements |
成人T細胞白血病 (ATL) はヒトT細胞白血病ウイルス1型 (HTLV-1) の感染によって引き起こされるCD4陽性T細胞の腫瘍性疾患であり、極めて予後不良である。根治療法や発症予防法は確立されておらず、新しい治療戦略が望まれる。申請者らの疫学研究によって得られた「水平感染後に感染者に誘導されるHTLV-1 Env蛋白質gp46 197-216AAを認識する抗体（gp46-197抗体）が、生体内プロウイルス量の抑制活性を持つ」という知見に基づき、感染者由来のモノクローナル抗体の医薬品化を目指す。HTLV-1水平感染者の抗原特異的記憶B細胞を単離し、分化増殖させることにより目的とする抗体を産生する形質細胞をクローン化し、抗体タンパク質の大量産生と性状解析を実施する。本研究課題では将来の医薬品化を目指した抗体医薬のProof of Conceptを取得するところまでを達成目標とする。本精製モノクローナル抗体医薬が実用化すれば、関連疾患発症の抑制、母児感染対策等において有用性が期待できる。
今回の検討では、gp46 197-216 AAペプチドを蛍光標識したペプチドプローブを作成した。同ペプチドプローブを用いてgp46 197-216 AAと特異的に反応するメモリーB細胞の検出方法を確立した。HTLV-1水平感染キャリアの末梢血PBMCよりgp46 197-216反応性メモリーB細胞を単離・培養し、抗体産生細胞クローンを２株得た。これらのクローンから産生されたgp46-197抗体のエピトープ は200-211 AA付近であると推定され、キャリア血漿中の抗体の主要エピトープ と一致していた。今後は取得した抗体の可変領域の配列決定、および細胞株での抗体産生を経て、抗体分子の大量取得を試みる。その後抗体の生理活性を解析する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
gp46 197-216 AAペプチドを蛍光標識したペプチドプローブを作成し、HTLV-1水平感染キャリアの末梢血PBMCよりgp46 197-216反応性メモリーB細胞を単離することに成功した。フィーダー細胞とヒトサイトカイン添加による長期誘導培養を経て、抗体産生細胞クローンを２株得た。
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| Strategy for Future Research Activity |
取得した抗体産生細胞クローンから産生されたgp46-197抗体のエピトープ は200-211 AA付近であると推定され、キャリア血漿中の抗体の主要エピトープ と一致していた。今後は取得した抗体の可変領域の配列決定、および細胞株での抗体産生を経て、抗体分子の大量取得を試みる。その後抗体の生理活性を解析する予定である。さらにより多様な抗体産生細胞クローンの取得を目指し、HTLV-1水平感染キャリアの末梢血PBMC からのgp46 197-216反応性メモリーB細胞の単離と培養を継続する。
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Report
(1 results)
Research Products
(8 results)
