がんの免疫逃避を克服する複合的がん免疫細胞療法の開発

• Project/Area Number: 22K08843
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 55020:Digestive surgery-related
• Research Institution: Shiga University of Medical Science
• Principal Investigator: 目片 英治 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (80314152)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 村田 聡 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (90239525) ; 谷 眞至 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (60236677)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 癌免疫細胞療法 / 免疫寛容 / CTL / OX40 / 免疫チェックポイント阻害薬 / LAP吸着カラム / mB7-DC-Fc

Outline of Research at the Start

細胞免疫治療で移入する癌抗原特異的CTLが、担癌生体内での免疫トレランスに打ち勝ち、抗腫瘍機能を維持可能な複合的がん免疫細胞療法を開発する。具体的には、抗OX40抗体がもつCTLへの機能増強作用と制御性T細胞への機能抑制作用、mB7-DC-FcのもつCTL機能増強作用、LAP吸着カラムによるTGF-β産生免疫抑制性細胞の除去作用、さらには、免疫チェックポイント阻害剤によるCTLの活性化維持作用を利用して、細胞移入した癌抗原特異的CTLが、癌免疫逃避を克服し、抗腫瘍機能を維持する事を、がん抗原特異的な免疫寛容マウスモデルを用いて検証し、さらにはヒト大腸癌抗原特異的CTL細胞の樹立へと展開する。

Outline of Annual Research Achievements

LAP吸着カラムによるTGF-β産生免疫抑制性細胞の除去作用、OX40のもつCTL機能増強作用と制御性T細胞の機能抑制作用、mB7-DC-FcのもつT細胞への補助刺激作用、PD-1 blockerさらには、CTLA-4 blockerによる免疫チェックポイント分子機能阻害作用など、ユニークな免疫作用物質を利用し、免疫トレランスに打ち勝つ癌抗原特異的CTL細胞治療法を、免疫寛容マウスモデルで樹立する事を本研究の目的として研究に取り組んだ。
〈癌抗原特異的CTLの樹立と移入された担癌生体内での機能維持〉
非免疫寛容マウスモデル（FVB/N）にて、LAP吸着カラムを用い免疫抑制性細胞を吸着除去した環境下で、癌抗原ペプチドを抗原提示する抗原提示細胞と、T細胞エフェクター機能増強のための１）抗OX40抗体　２）mutant-B7-DC-Fc癒合タンパク、免疫チェックポイント阻害剤である　３）抗PD-1抗体　４）抗CTLA-4抗体をそれぞれ共培養して癌特異的CTLを誘導し、レシピエント担癌（非免疫寛容）マウスに細胞移入して、抗腫瘍免疫効果を観察した。さらに、移入前のCTL(CD8＋T細胞) をCSFEで標識し、１）２）３）４）の各種免疫作用物質介入の有無により、移入後の担癌レシピエント内でのCD8＋T細胞分裂回数を比較した。次に、HER2特異的な免疫トレランスマウスを用いて、上記免疫作用物質で誘導したHER2特異的CTLが、免疫トレランス状態の担癌生体内で、HER2特異的抗腫瘍免疫効果を示すことを調べた。どのような複合免疫療法が移入されたCTLが担癌トレランスマウス内で最も抗腫瘍効果を発揮するかを比較しているところである。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

HER2特異的な免疫トレランスマウスを用いて、免疫作用物質で誘導したHER2特異的CTLが、免疫トレランス状態の担癌生体内で、HER2特異的抗腫瘍免疫効果を示すことを調べることができ、研究が進んだ。

Strategy for Future Research Activity

〈養子細胞移入するためのヒト癌特異的CTL細胞の樹立〉を目的とし研究を進める。
１）　ボランティア末梢血からインフルエンザ抗原（HA）特異的ヒトCTLが、マウス研究から得られる最適な方法で、効果的に誘導できることを確かめる。1. インフルエンザ罹患既往やワクチン接種既往のあるボランティア（HLA-A24+）末梢血からの、HA特異的CTL の樹立を再現する。　　2. HA 特異的ヒトCTL 誘導の際、HA ペプチドを提示するHLA-A24+抗原提示細胞と末梢血中T 細胞の培養時に、OX40 補助刺激、mB7-DC-Fc 刺激、PD-1 阻害剤、CTLA-4阻害剤を加えることが、ヒトリンパ球でのCTL 誘導に有用であることを明らかにする。
２）　大腸がん患者末梢血から大腸癌抗原特異的ヒトCTLが、大腸癌に特異性の高い4種類の癌抗原ペプチドと上記の免疫学的介入（免疫抑制性細胞吸着除去、OX40補助刺激、mB7-DCFc刺激、PD-1 / CTLA-4阻害剤の使用）で効果的に誘導できることを確かめる。　さらに、誘導できた癌抗原ペプチド特異的CTLが、大腸癌細胞株や、患者から切除された大腸癌細胞に対して抗腫瘍効果を示すことを調べる。