| Project/Area Number |
22K08937
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 55030:Cardiovascular surgery-related
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
白澤 文吾 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (80444719)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 亮 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (10570319)
上野 耕司 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (30736070)
濱野 公一 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60263787)
溝口 高弘 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (90844796)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | 細胞シート / 再生医療 / 細胞シート移植 |
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| Outline of Research at the Start |
細胞シートは様々な疾患に応用する研究が行われているが、臨床応用を考えたときに、細胞シートの製造コストと利便性の向上が課題である。
我々は細胞シートを凍結保存することが可能であれば、製造コストの低下、利便性が向上すると考え、これまで細胞シート凍結法の開発を行ってきた。
最近、我々は3Dフリーザーという凍結装置で細胞シートを凍結すると、解凍後の細胞の生存率が高いことを報告している。
本研究は、3Dフリーザーで凍結し、解凍後の細胞シートを動物モデルに移植することで有用性を証明するものである。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、糖尿病C57BL/6マウスの背部に6mmの生検パンチで作製した全層欠損部位に、凍結保存後に解凍して、移植した自家線維芽細胞シートおよび他家線維芽細胞シートの治療効果を検討した。
他家線維芽細胞シートは、C3Hの尾から単離した線維芽細胞から作製した。自家線維芽細胞も同様の方法で、C57BL/6マウスの尾から単離した線維芽細胞から作製した。細胞シートの作製および凍結方法として、24-well plateの1ウェルに4.2x105個の細胞を播種して一晩培養後、ウェルの培養液を細胞保存液に置換した。24-well plateを3Dフリーザーの庫内にセットし、-35℃、20分間で細胞を凍結後、24-well plateを-80℃フリーザーで冷凍保管した。細胞シート移植2日前に、24-well plateを37℃プレート上にセットし、細胞を解凍後にウェルの溶液を培地に置換して2日間培養した。そして、上記に記載した糖尿病C57BL/6マウスの背部に線維芽細胞シートを移植した。治療実験において、凍結していない非凍結自家線維芽細胞シートおよび非凍結他家線維芽細胞シートに対して、凍結解凍後に培養した自家線維芽細胞シートおよび凍結解凍後に培養した他家線維芽細胞シートの治療効果を比較検討した。自家および他家の両方において、凍結解凍後に培養した線維芽細胞シートは、非凍結線維芽細胞シートと同等の治療効果を示す結果を得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
凍結解凍後に培養した線維芽細胞シートの治療効果を検証することが出来たため。
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| Strategy for Future Research Activity |
治療実験時の組織を使用して、線維芽細胞シートの凍結の有無、および、他家線維芽細胞の免疫拒絶についての病理学的解析を行う。
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