腸内細菌叢の改善による反復性膀胱炎の新たな予防法と治療法の開発

Research Project

Project/Area Number	22K09473
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 56030:Urology-related
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	石井亜矢乃岡山大学, 大学病院, 准教授 (00423294)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岩田健宏岡山大学, 大学病院, 助教 (00803082) 村上圭史川崎医療福祉大学, 医療技術学部, 教授 (10335804) 狩山玲子岡山学院大学, 人間生活学部, 教授 (40112148)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2026-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2025: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000) Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Keywords	反復性膀胱炎 / 腸内細菌叢 / 栄養食事指導 / 次世代シーケンサー / バイオフィルム / 栄養指導
Outline of Research at the Start	反復性膀胱炎患者に対して腸内環境を整えるための栄養指導を行うことで、免疫力向上を図ると共に腸内細菌叢を改善し、ビフィズス菌や乳酸菌等の比率が増加することに伴い、尿路感染症の起因菌となる大腸菌の比率を減少させることで反復性膀胱炎の再発率を抑制することができるかを検討する。実験研究では、反復性膀胱炎患者等から分離された大腸菌の病原因子と抗菌薬抵抗性を評価することで病原性の高い大腸菌を見出し、抗バイオフィルム効果に関する検討を重ねる。以上の臨床的・基礎的研究により新たな予防法と治療法の開発を目指す。
Outline of Annual Research Achievements	腸内細菌叢の改善による反復性膀胱炎の新たな予防法と治療法の開発をするために、臨床研究ならびに基礎研究を実施した。 1.2022年度は、健常者と非反復性膀胱炎患者および反復性膀胱炎患者の膣・腸内細菌叢について次世代シーケンサーによる解析を行うために臨床研究を行った。健常者10例、非反復性膀胱炎患者10例で膣・直腸サンプルの全ゲノム配列を次世代シーケンサーにより決定し細菌叢の解析を行った。解析結果を上位から3つずつ示すと、健常者の直腸ではBacteroidales目、Prevotella属、Escherichia属、膣ではPrevotella属、Lactobacillus属、Streptococcus属、非反復性膀胱炎患者の直腸ではPrevotella属、Bacteroides属、Porphyromonas属、膣ではLactobacillus属、Prevotella属、Gardnerella属であった。 2.反復性膀胱炎患者に対する新たな臨床研究で用いる食事調査法を検討した。1）BDHQ(簡易型自記式食事歴法質問票)は習慣的な食事を把握でき、調査への回答負担も少ないため、アセスメントに用いる。2）プロバイオティクスについては、発酵食品の摂取状況を追加で行う。プレバイオティクスについては、「発酵性食物繊維」に着目して追加調査を行う。また、食品からのオリゴ糖摂取量を求める。腸内細菌叢改善を目的に摂取している医薬品、医薬部外品、保健機能食品等についてもアセスメントを行う。 3.in vitro実験では、反復性・非反復性膀胱炎患者の尿路・直腸より分離された大腸菌における病原遺伝子の解析に着手した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 健常者、非反復性膀胱炎患者、反復性膀胱炎患者での膣・腸内細菌叢についての臨床研究はおおむね順調に進んでいる。反復性膀胱炎患者については、本臨床研究開始後に既存の検体（膣・直腸の検体がある場合）との比較も行うこととしたため、変更申請に伴う同意書の再取得が必要となり時間を要した。そのため、2022年度は反復性膀胱炎患者に栄養食事指導を行い、その前後の膣・腸内細菌叢の変動を次世代シーケンサーによる解析結果に基づいて検討する新たな臨床研究について申請する予定であったが、申請できていない。栄養食事指導時の食事調査法については2022年度に検討を行った。 in vitro実験は、実験系の立ち上げに時間を要し遅れている。
Strategy for Future Research Activity	1.2022年度に行った閉経後女性における反復性膀胱炎患者と非反復性膀胱炎患者および健常者との膣・腸内細菌叢の比較検討の臨床研究は、引き続き2023年度も継続し、次世代シーケンサーにより得られたデータ（全ゲノム配列）を解析する。 2.2023年度は、反復性膀胱炎患者に栄養食事指導を行い、その前後の膣・腸内細菌叢の変動を次世代シーケンサーによる解析結果に基づいて検討する新たな臨床研究を立ち上げる。 3.in vitro実験系を用いて、尿路・直腸由来大腸菌の病原因子と抗菌薬抵抗性について検討する。