| Project/Area Number |
22K09508
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
海野 怜 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (40755683)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田口 和己 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (00595184)
安藤 亮介 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (30381867)
安井 孝周 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (40326153)
岡田 淳志 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (70444966)
杉野 輝明 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (70881746)
濱本 周造 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (80551267)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
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| Keywords | オートファジー / 尿路結石 / RNA sequencing / シングルセル / 腎結石 / シングルセルRNAシークエンス |
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| Outline of Research at the Start |
尿路結石の生涯罹患率は増加しており、形成機序の解明と再発予防法の確立は急務である。私たちは、細胞保護作用をもつオートファジーの低下が、結石形成の契機になることを発見し、オートファジーの制御により結石形成を予防できるという概念を提唱した。本研究では、上述した研究[1] [2]で腎尿細管培養細胞、ヒト腎乳頭組織を用いたトランスクリプトーム解析を行い、結石抑制に特異的なオートファジー依存型結石抑制遺伝子を同定する。さらに、上述研究[3]で同定遺伝子の結石抑制効果をマウスモデルで検証することで、分子標的治療へと臨床応用することを目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
ランドールプラークと腎乳頭組織は、結石手術を受けた成人患者から採取した。snRNAseqは10X Genomicsプラットフォームを用いて実施し、追加の組織サンプルは免疫組織学的染色に使用した。データ解析はR StudioとSeuratを用いて行い、細胞間分子相互作用はCellphoneDBを用いて予測した。結果として、最終的なデータセットは、24人の患者から得られた34,468個の核で構成されていた。骨髄細胞は、一般的に発現するマーカーに基づいて同定された。ランドールプラーク組織には、これまで報告されている組織常在性マクロファージと一致する、特徴的なマクロファージ集団が多数存在することが確認された。ケモカインシグナル伝達は、血管内皮細胞ではなく、ヘンレ係蹄の上皮細胞に由来すると考えられた。これらのマクロファージは、免疫蛍光染色で確認されたように、M1およびM2の両極性マーカーを発現し、様々なコラーゲンアイソフォームを発現していた。また、線維芽細胞とリガンド-受容体相互作用を起こし、線維化促進経路に寄与していた。ランドールプラークは、単球由来のマクロファージではなく、組織常在性マクロファージと関連していることから、これらのマクロファージがコラーゲン沈着および線維化に関与している可能性が示唆される。これらのマクロファージがランドールプラーク形成の原因因子であるかどうかを明らかにするには、さらなる研究が必要である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
概ね順調である。現在追加の解析を行っている。
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| Strategy for Future Research Activity |
組織に常在するマクロファージとオートファジーの起点となるmTOR経路との関係が明らかになったため、今後上流・下流のシグナル解析を行っていく。
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