| Project/Area Number |
22K09553
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
幸田 力 昭和大学, 医学部, 准教授 (10365752)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
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| Keywords | サイトメガロウイルス / 腸内細菌叢 / ウイルス再活性化 / 再活性化 / 腸内細菌 |
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| Outline of Research at the Start |
ヒトサイトメガロウイルス（HCMV）は感染すると生涯にわたり潜伏感染する。妊婦においてHCMVは非常に高い割合で再活性化し、先天性CMV感染症を起こすだけでなく低出生体重児における新生児CMV感染症の原因となり問題化している。我々は妊娠に伴うCMV再活性化の動物モデルを作成し、抗生物質投与により腸内細菌叢を変化させたマウスではウイルス再活性化が抑制されること見出した。これまでウイルスの再活性化機序の解析に動物モデルを用いた研究がないことや、腸内細菌叢がウイルス再活性化に関わっているという報告がないことから、本研究では腸内細菌がウイルス再活性化にどのように関わっているのかを検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は昨年度までに妊娠に伴うサイトメガロウイルス（CMV）再活性化の動物(マウス)モデルを作成し、そのマウスモデルを使用して抗生物質投与により腸内細菌叢を変化させたマウスではウイルス再活性化が抑制されることを見出した。この内容の論文化にあたって査読者より、幾らかの指摘を受けたため、本年度はマウスモデルに関して基礎的な試験を主におこなった。まず最初にCMV接種後４週間では潜伏感染が成立していない可能性があるとの指摘から、CMVが急性感染から潜伏感染へ移行する時間の検討からおこなった。マウスにCMVを接種し、接種後４週間と20週間で各臓器におけるCMV動態を比較した。CMVを30000PFU /マウス接種した場合には、接種後４週においても尿中や唾液腺などからCMVが検出され、高濃度でウイルスを接種した場合には４週では潜伏感染への移行は不十分であった。これに対し3000 PFU /マウスのCMV接種では４週間で潜伏感染に移行することを明らかにした。また300 PFU /マウスのCMV接種では、潜伏感染に移行したものの妊娠時におけるウイルスの再活性化が不安定であり、動物モデルとしては不十分なものであった。併せてこの時、ウイルスの再活性化は妊娠２から３週以降に起こることも明らかにした。
これまで腸内細菌がCMVの再活性化に関与していることを明らかにしてきたが、腸内細菌の代謝産物である酪酸がウイルスの増殖促進に関与していることも明らかにした。この時、酪酸がウイルス感染細胞においてエクソソームの産生誘導をすることも示された。現在、産生誘導されたエクソソームがウイルスの増殖促進に関与しているか否かを検討している。加えてCMVの再活性化にエストロゲンが関与していることも明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度はマウスモデルの基礎的なデータ収集を主に行なったが、腸内細菌由来の代謝産物である酪酸がウイルス増殖に関与していること、さらにCMV感染細胞からエクソソームを産生誘導することが明らかとなり、エクソソームの解析に着手し始めることが出来たことから、概ね順調に進んでいると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
腸内細菌由来の代謝産物である酪酸がウイルス増殖に関与していること、さらにCMV感染細胞からエクソソームを産生誘導することが明らかとなったことから、産生誘導されたエクソソームがCMV増殖促進に関与しているか否かを評価する。具体的には産生誘導されたエクソソームを精製・抽出し、CMV感染細胞を刺激することによってウイルス増殖に関与しているか否かを調べる。また同時にCMV潜伏感染細胞を刺激することによってCMV再活性化への関与も調べる。関与が明らかとなった場合にはエクソソーム内の物質の同定を行う。さらにエストロゲンの関与についても引き続き解析を行う予定である。
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