| Project/Area Number |
22K09655
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | Osaka Medical and Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
田中 智人 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (90411363)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 正美 大阪医科薬科大学, 医学部, 准教授 (00551748)
大道 正英 大阪医科薬科大学, 医学部, 教授 (10283764)
田中 良道 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (10625502)
恒遠 啓示 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (70388255)
上田 尚子 大阪医科薬科大学, 医学部, 助教 (70920148)
藤原 聡枝 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (90707960)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000)
Fiscal Year 2024: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 細胞外小胞 / マイクロRNA / 腫瘍免疫 / 臨床腫瘍検体直接移植モデル / 直接腫瘍移植モデル / 癌免疫 |
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| Outline of Research at the Start |
細胞外小胞(EVs)は、細胞間のコミュニケーションを媒介し、免疫応答や血液凝固など様々なプロセスに関与している。EVsの中には抗腫瘍免疫における応答や、炎症を抑制する免疫寛容性などを誘導する様々なタンパクやメッセンジャーRNA (mRNA)、マイクロRNA (miRNA)が含まれており、癌細胞の免疫寛容や増殖や浸潤・転移に関わっている。我々のこれまでの実験では、癌細胞は自ら放出したEVsにより免疫寛容を引き起こしていることが示唆される。そこで本研究では、婦人科癌における癌特異的EVs内のmiRNAを同定し、EVsあるいはmiRNAが免疫細胞に及ぼす影響を解明する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
卵巣明細胞癌に特異的なEVs内miRNAを6種類同定しており、早期発見のマーカーとして役立つことを確認した。また、卵巣癌において、EVs内のRNA修飾体3種類を組み合わせることにより、プラチナ感受性を予測するマーカーとして機能することを発見した。卵巣癌由来のEVsでは、小胞径200nm程度のものが単球に有意に取り込まれていることを確認した。また、これらの小胞を取り込んだ単球からは種々のサイトカインが有意に放出されており、転移や浸潤に影響を与えていることが示唆された。In vivoではTe-EVsを投与した個体は明らかに癌の発育が早いことを確認しており、これらの癌組織から放出された細胞外小胞を特異抗体で制御することにより、免疫機構を利用した新薬の開発に取り組む予定である。さらに、新たな動物モデルとして、子宮体部悪性腫瘍に対するPDXマウスを樹立し、EVsを含める原発巣との類似性を証明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
子宮頸癌細胞株SihaおおよびHellaを用いて、マウスに腫瘍組織を作成し、作成した腫瘍組織から直接高濃度のEVsを採取した。1μg/1μlのEVsを含むPBS溶液を作成し、SihaおおよびHellaで作成したマウス腫瘍モデルに0.1ml/2回/週の尾静脈注射を行ったところ、明らかな腫瘍増大を認めた。
また、手術切除した子宮頸癌組織より、PDXを複数個作成し、腫瘍組織を増殖させたのち、腫瘍細胞より直接EVｓを採取し、多量に採取した高濃度EVsを子宮頸癌PDXマウスに継続注射したところ明らかな腫瘍増大を認めた。
異常の実験により、癌由来のEVsには腫瘍増大効果があることを確認した。
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| Strategy for Future Research Activity |
EVsの腫瘍増大効果を証明するために、EVsを抑制することを目的とした。抑制には免疫細胞のによる不活化を考えている。MSI-highもしくはRRRdの子宮体癌組織よりPDXを作成し、高濃度のPDL1発現EVsを採取する。MMRpのPDXを作成し、PDL1発現EVs、通常EVs、抗PDL1抗体を用いて、腫瘍の増大を確認する。
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