| Project/Area Number |
22K09722
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56050:Otorhinolaryngology-related
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
成田 憲彦 福井大学, 学術研究院医学系部門, 客員教授 (80345678)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 有未 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 特命助教 (00646458)
高林 哲司 福井大学, 学術研究院医学系部門, 准教授 (70397272)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 甲状腺がん / IL-1RN / 乳頭癌 / 増殖 / 分子標的治療 / 穿刺吸引細胞診（FNA) / 液状化細胞診(LBC) / 甲状腺癌 / FNA / LBC |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では甲状腺FNAにおけるclass Ⅲ（鑑別困難）例から、効率的に悪性を検出する実用可能な新規LBC免疫染色マーカーの同定・確立を目指す。初期実験としてのPCRアレイ解析で、乳頭癌でIL-1RNの発現が良性腫瘍に比べ有意に増加していることが解った。FNA(LBC)サンプルを用いてIL-1RNを染色し、手術後の病理診断と比較検討した結果、IL-1RNが陽性的中率100%で悪性を検出することを見出した。本研究でIL-1RNの甲状腺癌FNA(LBC)診断マーカーとしての実用化を目指し、さらに乳頭癌における機能を解析することで、新規分子標的治療の可能性を明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
甲状腺良性腫瘍(n=5)と乳頭癌(n=5)のmRNAでPCRアレイにより2群間の遺伝子発現の差違を解析した。この結果、乳頭癌でIL-1RNが約7.4倍に高発現していることが解った。臨床応用可能なマーカーは免疫染色で判定できるものが理想である。そこでFFPEブロックを用い、IL-1RNの発現を免疫組織染色で確認した。甲状腺良性腫瘍20例、乳頭癌69例を免疫染色したところ、IL-1RNは乳頭癌で有意に高発現していることを確認した。次に初期実験として実際のFNAサンプル(LBC)で もIL-1RNが染色できることを手染めによる免疫染色で確認した。当院ではLBCサンプルの免疫染色は、自動免疫染色装置(Leica社製BOND-III)で行っている。実臨床と同じくIL-1RNを自動免染できるかを20例のLBCサンプルで検討したところ、問題なく染色できることが解った。更に23例を追加検討し、手術標本の最終病理結果と比較した。この結果、IL-1RNの陽性的中率は100%であることが明らかとなった。また既知のマーカーであるCD15との併用で診断すると、正診率81%、感度も77%と良好な結果が得られた。これはFNAの結果、細胞形態から診断がつかなくとも、IL-1RNあるいはCD15の少なくともどちらかが陽性であれば、100%悪性腫 瘍であり全悪性腫瘍の77%を検出している、ということを意味する。この結果はIL-1RNの臨床応用の可能性を示すものと考える。現在症例数を120~150例に増やし、甲状腺癌診断マーカーとしての確立・実用化を研究中である。また甲状腺乳頭癌細胞幹部MDA-T32にリコンビナントIL-1RNを添加し、24時間後にMTTアッセイで細胞生存能を解析したところ、IL-1RNは濃度依存性に乳頭癌細胞右の増殖を誘導することが解った。これらのことから、IL-1RNは甲状腺乳頭癌の新規標的分子となる可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在計画通り、症例数を蓄積中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
免疫染色のサンプル数を手術検体、FNAサンプルとも150程度に増やし最終解析とする。細胞株を用いたIL-1RNの機能解析で浸潤・転移能に関係するかを解析する。
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