| Project/Area Number |
22K09842
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56060:Ophthalmology-related
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
藤枝 弘樹 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (70280972)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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| Keywords | ミュラー細胞 / 視細胞傷害 / p38 / 増殖 / 遊走 / 器官培養 / 網膜 / ミュラーグリア / グリオーシス |
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| Outline of Research at the Start |
ヒトを含む哺乳類の網膜は一度傷害されると再生しない。しかし魚類では網膜のミュラー細胞が増殖して神経を再生する。哺乳類のミュラー細胞が神経再生できない理由を明らかにするために、p38MAPKと呼ばれる酵素の役割に着目し、この酵素がミュラー細胞の増殖を抑制し、グリオーシスと呼ばれる反応を促進することで神経再生を阻害している可能性を検討する。ミュラー細胞におけるp38MAPKの役割の解明は、網膜疾患の新規治療法の開発に寄与することが期待される。
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| Outline of Annual Research Achievements |
2023年度は、生体内（vivo）および網膜器官培養（explant）モデルを用いて、前年度に実施した予備実験の成果をさらに詳細に解析した。まずMMS投与によりラット視細胞傷害モデルを作製し、ミュラー細胞のp38発現と傷害後反応（増殖、DNA損傷応答、細胞死、外顆粒層への遊走、視細胞貪食など）の経過をvivoとexplantで比較した。ミュラー細胞のp38発現、増殖、DNA損傷応答はvivoとexplantで大差はなかったが、explantではミュラー細胞の遊走と視細胞貪食が顕著に抑制されていた。こうしたexplantモデルの特徴を把握したうえで、explantを用いたp38阻害実験を行った。MMS投与後1日目で培養を開始し、DIV1、DIV2、DIV3の３ステージでp38阻害の効果を検討した。p38阻害剤投与により、ミュラー細胞の増殖および外顆粒層への遊走が有意に増加し、p38がミュラー細胞の増殖と遊走を抑制していることが示唆された。p38阻害はp53とp21の発現を減少させ、p38がこれらの細胞増殖抑制因子の活性化を介してミュラー細胞の増殖を抑制している可能性が示唆された。一方、p38阻害により、Crx陽性、TUNEL陰性の生存視細胞の数が有意に増加した。傷害網膜でp38はミュラー細胞特異的に発現するので、p38阻害による視細胞生存への効果はミュラー細胞が分泌する神経保護因子等への影響を介したものである可能性があり、今後p38による神経保護因子発現の制御を詳細に検討していく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
網膜器官培養モデルの確立と、当モデルを用いたp38阻害実験が予定通り進展しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでは主に免疫組織化学的な解析を行ってきたが、今後はWestern blotting、qRT-PCRによる定量的な解析を進める予定である。またp38によるミュラー細胞増殖の制御、視細胞生存への影響について、そのメカニズムを詳しく解析していきたい。
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