胎児皮膚細胞混濁液による皮膚再構築因子の解明

• Project/Area Number: 22K09891
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 56070:Plastic and reconstructive surgery-related
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 藤原 綾乃 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (80815952)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 加藤 達也 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (60641321)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: 創傷治癒 / 皮膚再構築 / 皮膚細胞混濁液 / 胎児マウス

Outline of Research at the Start

ヒトを始め哺乳類の皮膚はいったんある程度以上の損傷を受けると、傷跡が残る。皮膚には脂腺や汗腺、毛包などの皮膚付属器が存在し、その存在が肌理（キメ）に重要であることがわかっている。胎児マウスの皮膚細胞混濁液を作成し創傷に移植することで、皮膚付属器を含め他皮膚の再構築が可能なのに対し、成体マウスの皮膚細胞混濁液では皮膚の再構築が起こらない。この違いに着目し、細胞腫の解析、網羅的遺伝子解析、関連分子シグナルの検討を行うことで、皮膚再構築に必要な分子を解析し細胞混濁液による皮膚再構築を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

皮膚細胞混濁液に含まれる細胞数を同量にしても皮膚再構築は起こらなかったことより、まず細胞腫に違いがある可能性を考えた。週齢により上皮の厚さや真皮における細胞密度に違いはあり、フローサイトメトリー（CantoII）を使用し細胞腫の割合を比較検討した。
胎生18日と4週齢のGFP導入C57Bl/6Jマウスの皮膚をhomogeniseした後、0.1% collagenase1(2%BSA in DMEM)で37℃1時間反応させ皮膚細胞混濁液を作成した。それぞれChamber法でC57Bl/6Jマウス（オス、8週齢）の背部皮膚潰瘍部にそれぞれ移植する際。フローサイトメトリーの結果、細胞数に明らかに胎生１８日の皮膚細胞混濁液に多く含まれた違細胞を４週齢の皮膚細胞混濁液に追加し移植実験を行った。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

妊娠出産の影響でやや遅延が生じている。

Strategy for Future Research Activity

皮膚細胞混濁液の検討をフローサイトメトリーで進める。さらに構築した皮膚についても詳細な検討を加える予定である。