| Project/Area Number |
22K09929
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57020:Oral pathobiological science-related
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| Research Institution | Ohu University |
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Principal Investigator |
加藤 靖正 奥羽大学, 歯学部, 教授 (50214408)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前田 豊信 奥羽大学, 歯学部, 教授 (10382756)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
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| Keywords | 酸性細胞外pH / 酸性細胞外pH依存性 / がん転移 |
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| Outline of Research at the Start |
酸性細胞外pHは代謝の結果としてのみならず、自身に作用する転移促進性の細胞外環境である。本研究では、遺伝子発現の最適pHがあり、転移成立に寄与していることを、public database用いたアプローチや、CRISPR-Cas9による遺伝子改変細胞による検証を介して新規の酸性細胞外pH反応性がん転移促進／抑制因子を同定する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
腫瘍組織内の細胞外pHは酸性を示すことは古くから知られている。私達は、これまでに高転移性マウス B16-BL6メラノーマにおいてMMP9の発現がpH 5.9 で強く誘導されることを見出し、その詳細について報告してきた。昨年度、B16-BL6細胞における酸性pHにより発現が変動する遺伝子を酸性pH誘導型、抑制さ れる遺伝子を酸性pH抑制型遺伝子とし、これらの遺伝子について、ヒト腫瘍における生存期間について検討した。発現誘導と一致した動態を示す場合をヒット数としてカウントした。酸性pH誘導型遺伝子、酸性pH抑制型遺伝子それぞれにおいて、ヒット数上位の遺伝子のうち酸性pH誘導型遺伝子としてSP100、酸性pH抑制型遺伝子としてSLC18A1について注目し、8種類の細胞株（メラノーマ(A2058, A375C5)、頭頚部扁平上皮癌(HSC3, HSC4, SAS)、肺癌 (A549, H1299, HT1080)）で検証実験を行った。SP100は現在までに６つのスプライシングバリアントが確認されているため、それぞれの発現における酸性の影響を調べたところ、バリアント２の遺伝子発現レベルが最も高く、次いでバリアント１の発現が高かった。それ以外のバリアントの発現レベルは約1/10000だった。A357C5、SAS、H1299、HT1080で、酸性pHによりバリアント２の発現が上昇した。酸性pH抑制型遺伝子として分類されたSLC18A1遺伝子は、2種類のメラノーマのみで発現しており、期待に反して酸性pHに反応して発現誘導された。今後、これらの遺伝子発現と酸性pHによる誘導のメカニズムについて細胞レベルで検討していく。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
候補遺伝子として、B16-BL6メラノーマでの発現変動値が高いもののうち、ヒトのホモログの発現と生存期間が相関するものをヒット数としてカウントした結果、各臓器の腫瘍を酸性pH依存性の観点から分類できるという内容の論文を投稿することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
候補遺伝子として、B16-BL6メラノーマでの発現変動値が高いもののうち、ヒトでのホモログの発現と生存期間が相関するものについて、細胞株を用いて検証する。
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