新規ニッケル結合性T細胞を基軸としたニッケルアレルギー病態形成機構の解明

Research Project

Project/Area Number	22K09939
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 57020:Oral pathobiological science-related
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	黒石智誠東北大学, 歯学研究科, 講師 (30400261)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	菅原俊二東北大学, 歯学研究科, 教授 (10241639) 江草宏東北大学, 歯学研究科, 教授 (30379078)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords	金属アレルギー / ニッケルアレルギー / CD4陽性T細胞
Outline of Research at the Start	金属アレルギーは金属イオンに対する細胞性免疫依存型のIV型アレルギーである。しかしながら、「金属イオン特異的T細胞の活性化」という金属アレルギーの本質は依然として解明されていない。研究代表者らはマウスモデルを用いた解析から、Ni結合性CD4+T細胞という新たな細胞ポピュレーションを見出した。本研究課題では、マウスモデルおよびヒト臨床検体を用いてNi結合性CD4+T細胞の性状を解析し、Niアレルギーにおけるその役割を解明する。これにより、Niアレルギーのみならず、金属アレルギー全体に対する新たな予防・診断・治療法の創造を目指す。
Outline of Annual Research Achievements	皮膚所属リンパ節におけるNi結合性CD4+T細胞の解析マウス皮膚所属リンパ節細胞をin vitroでNi溶液と反応させた後、金属イオン蛍光プローブであるNewport green（NPG）および各種蛍光抗体で染色し、フローサイトメトリーで解析した。その結果、CD4+T細胞（B220-NK1.1-CD4+）の約0.5%がNPG強陽性のNi結合性細胞であった。また、CD4+T細胞全体の約24%がCD62L-であったのに対し、Ni結合性CD4+T細胞では約95%がCD62L-であった。さらに、CD4+T細胞全体の約4%がCD25+であったのに対し、Ni結合性CD4+T細胞では約13%がCD25+であった。同様の方法で解析したNi結合性樹状細胞の場合、Ni結合能（NPG染色の平均蛍光強度）について、皮膚所属リンパ節では腸間膜リンパ節に比較して有意に高値であった。これに対し、Ni結合性CD4+T細胞の場合、その存在比率やNPG染色の平均蛍光強度について、両リンパ節の間に有意差は認められなかった。 NiアレルギーマウスにおけるNi結合性CD4+T細胞の解析 Ni感作マウスの耳介にNi溶液を皮下接種し（Niチャレンジ）、Niアレルギー性炎症を誘導した。そして、所属リンパ節（耳介リンパ節）と非所属リンパ節（鼠経リンパ節）におけるNi結合性CD4+T細胞を解析した。その結果、所属、非所属リンパ節のいずれにおいても、Ni結合性CD4+T細胞の存在比率やNPG染色の平均蛍光強度に有意な差は認められなかった。また、ナイーブ（Ni非感作）マウスの耳介へリポポリサッカライド（LPS）や高濃度Ni溶液を皮下接種し非アレルギー性炎症を誘導した場合においても、所属リンパ節と非所属リンパ節におけるNi結合性CD4+T細胞の存在比率に有意な差は認められなかった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 「皮膚所属リンパ節におけるNi結合性CD4+T細胞の性状」や「NiアレルギーマウスにおけるNi結合性CD4+T細胞の変動」について研究を進めることは出来たが、本研究計画の主要な目的である「Ni結合性CD4+T細胞における遺伝子発現の網羅的解析」を行うことができなかったため「やや遅れている」とした。
Strategy for Future Research Activity	研究体制は変更せず、研究分担者および研究協力者と緊密に連携し、精力的に研究を推進する。初年度に行うことが出来なかった「Ni結合性CD4+T細胞における遺伝子発現の網羅的解析」を重点的に進める。