| Project/Area Number |
22K09971
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57030:Conservative dentistry-related
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
村松 敬 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00276982)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三友 啓介 東京歯科大学, 歯学部, 非常勤講師 (90844051)
溝口 利英 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (90329475)
山口 朗 東京歯科大学, 歯学部, 客員教授 (00142430)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
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| Keywords | 歯髄 / 歯髄血管再生療法 / 歯根膜 / 根尖組織 / 間葉系幹細胞 / Type H 毛細血管 / Type H 血管 / シングルセル解析 / セメント芽細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
根未完成歯に対する歯内療法には歯髄血管再生療法がある。本療法の治癒過程では，まず根管内へ血管が侵入し，次いで根尖部や根管壁にセメント質が添加されるが，その過程に関与する細胞群の由来と分化制御機構は明らかにされていない．最近，骨髄で幹細胞ニッチとなる特異的な血管（Type H 血管）が同定され，硬組織形成に寄与することが明らかにされている．そこで本研究では，歯髄血管再生療法のマウスモデルを用いた形態学的解析，遺伝子改変マウスを用いた細胞系譜解析とシングルセル解析による分子生物学的解析を活用して、治癒過程で出現する Type H 血管の局在とセメント芽細胞の分化過程とその制御機構を明らかにする．
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はこれまでに歯髄血管再生療法のマウス実験モデルを作製し、治癒過程 を検討してきた。その結果，根尖から根管内へCD31とendomucinに強陽性を示す 血管が侵入し、さらに歯根膜組織あるいは根尖組織に由来する間葉系幹細胞が 侵入・増生し、セメント質様硬組織が形成されることを明らかとした.一方、セ メント質の添加や修復象牙質の形成に寄与する間葉系幹細胞がAxin2 を発現す ることが知られている(Xie et al.，J Dent Res，2019)。そこで2023年度は. 歯髄血管再生療法後のAxin2発現細胞の局在や硬組織形成への関与を検討した。
実験にはAxin2-CreERT2/flox-stop-flox-Tomato マウスを作出して、このマ ウスに我々が開発した実験方法を応用し(Komada et al., Front Dent Med 2022)、 細胞系譜解析を行った.その結果、術後7日では根尖周囲組織へTomato陽性細胞 およびosterix陽性細胞の集積が認められ，一部はTomato 陽性細胞と共陽性を 示した。術後14日では，Tomato 陽性細胞が根管上部にへと侵入していた.Osterix 陽性細胞は根管壁に沿って根管内全体に認められ，一部はTomato 陽性細胞と共 陽性であった.
以上の結果から，歯髄血管再生療法後の治癒過程においては、Axin2 を発現 する間葉系幹細胞が根尖周囲組織から根管内へ経時的に侵入した後にセメント 芽細胞に分化し，根管内や根尖部に硬組織を形成していくと考えられた。
2023年度に得られた結果は第158,159回 日本歯科保存学会、第315,316回 東京歯科大学学会で発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定通りで、2022年度にType H血管の変化、2023年度に間葉系幹細胞の由来、局在、硬組織形成への関与がわかってきた。また前年度よりも実験モデルの精度が高くなってきて、安定した結果が出てきる。2024年度に行うシングルセル解析の足がかりはできたと考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
2022, 2023年度の結果をもとにシングルセル解析を行い、結果をまとめて論文作成、投稿を目指す。
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