口腔発癌における骨髄幹細胞の関与：マウスモデルを用いた検証と診断への応用

• Project/Area Number: 22K10179
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 57060:Surgical dentistry-related
• Research Institution: Dokkyo Medical University
• Principal Investigator: 川又 均 獨協医科大学, 医学部, 教授 (70224847)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2027-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2026: ¥390,000 (Direct Cost: ¥300,000、Indirect Cost: ¥90,000); Fiscal Year 2025: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2024: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2022: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
• Keywords: 口腔扁平上皮癌 / 発生母細胞 / 唾液腺 / 骨髄細胞 / マウス / 免疫染色

Outline of Research at the Start

口腔扁平上皮癌は，上皮幹細胞ばかりか唾液腺幹細胞，骨髄由来幹細胞からも発生し得ることを，臨床材料を用いて間接的に証明してきた．本研究では，口腔重層扁平上皮が骨髄由来幹細胞（間葉系幹細胞）から分化可能であるか，さらにその骨髄幹細胞由来口腔重層扁平上皮細胞は癌化のリスクが高く，実際に癌化するかを動物実験で直接的に証明する．それと並行して，これまでの臨床研究，基礎研究で得られた口腔扁平上皮癌の発生母細胞を識別し得る分子マーカーを用いて，マイクロアレイ解析により，検査レベルで骨髄幹細胞由来超高悪性口腔扁平上皮癌や唾液腺幹細胞由来高悪性口腔扁平上皮癌をハイスループットで診断するシステムを構築する．

Outline of Annual Research Achievements

マイクロアレイ解析と並行して，ハイスループットな方法として免疫染色での解析を並行して行っている．マイクロアレイで同定した発生母細胞を同定可能な遺伝子産物に対する抗体を選別し，予備実験で免疫染色に使用可能か，評価可能かを検索した．その結果３種類の抗体が免疫染色に使用可能であることが検証できた．５０症例以上の口腔扁平上皮癌で免疫染色が終了し，現在評価をを行っているところである．発生母細胞（今回は唾液腺由来）臨床病態，病理所見，予後等との関連を検討しているところである．

動物実験に関しては，移植手技の安定化に注力しており，安定してくれば，炎症誘発，上皮の修復に骨髄細胞の関与があるかを検証する予定である．

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

動物実験の再現性が安定せず，移植成功した動物の数が揃えられない．手技の改善を行っている．免疫染色による発生母細胞の同定は概ね順調に進んでおり，今年度内に一定の結論を出せそうである．

Strategy for Future Research Activity

動物実験に関しては，マウスの骨髄移植の手技を完成しているラボに出向き，種々ノウハウを習得する予定にしている．免疫染色は継続して解析を行う．マイクロアレイのサンプルはある程度集積したところで解析に回す予定である．