フッ化物抵抗性根面齲蝕関連菌の代謝動態解明のためのトランスクリプトーム解析

Research Project

Project/Area Number	22K10283
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 57080:Social dentistry-related
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	川嶋順子東北大学, 東北メディカル・メガバンク機構, 助教 (50633707)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	安彦友希東北大学, 歯学研究科, 助教 (00470170) 鷲尾純平東北大学, 歯学研究科, 准教授 (20400260)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Discontinued (Fiscal Year 2024)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000) Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Keywords	Actinomyces / Streptococcus / 根面う蝕 / フッ化物 / 糖代謝 / 酸産生 / 紺面齲蝕 / トランスクリプトーム
Outline of Research at the Start	齲蝕は、主に口腔細菌の糖代謝によって産生される酸に起因するが、根面齲蝕関連菌であるActinomycesの糖代謝経路は代表的な齲蝕関連菌であるStreptococcusとは大きく異なる。Actinomycesは、齲蝕予防剤として世界中で広く利用されているフッ化物に耐性を持つことが明らかとなっているものの、その代謝経路の詳細は不明である。本研究では、口腔Actinomycesの代謝活性に対するフッ化物の効果に着目し、増殖抑制や酸産生抑制作用についてトランスクリプトーム解析を中心とした代謝メカニズムに関する多角的な解析を基に、代謝経路の解明と効果的なフッ化物応用法の検討・提案を目指す。
Outline of Annual Research Achievements	本研究は口腔Actinomycesの代謝活性に対するフッ化物の効果に着目し、同菌の代謝メカニズムに関する分析化学的および分子生物学的アプローチを基に、代謝経路の解明と効果的なフッ化物応用法を検討・提案することを目的としたものである。口腔Actinomycesは、根面齲蝕を予防する上でのターゲットとなる細菌である。齲蝕は、主に口腔細菌の糖代謝によって産生される酸に起因するが、Actinomycesの糖代謝経路は代表的な齲蝕関連菌である口腔Streptococcusとは大きく異なる。Actinomycesは、齲蝕予防剤として世界中で広く利用されているフッ化物に耐性を持つことが明らかとなっているものの、その代謝経路の詳細は不明である。今年度は、Actinomyces 2菌種とStreptococcus 1菌種を対象としてフッ化物による増殖抑制についてサンプリングとそのトランスクリプトーム解析を行った。RNA抽出については、一度冷凍したサンプルを利用している。凍結融解に伴う細胞破壊により、RNAの抽出効率を高める目的で行っていたが、同時にRNAの分解の危険性もあるため専用の保護液も併用した。手技に対する習熟度の問題点もあり、想定よりも低品質のRNAとなってしまったため、ライブラリ調整完了時のクオリティも想定よりも低いものとなってしまった。RNA抽出やライブラリ調整の部分については、これまでにも検討してきたところであるが、フッ化物の共存条件下でのRNA抽出については、より一層の丁寧な調整が必要である。

Report

(3 results)