| Project/Area Number |
22K10326
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57080:Social dentistry-related
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| Research Institution | Osaka Dental University |
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Principal Investigator |
堂前 英資 大阪歯科大学, 歯学部, 講師 (50454559)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | カンジダリシン / Candidalysin / カンジダ / Heparin / C. albicans |
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| Outline of Research at the Start |
カンジダリシンはカンジダ症の病原因子として2016年にcandida albicansから分離同定されたペプチドトキシンである。カンジダリシンを欠損したC. albicansはカンジダ症を発症しないことから、カンジダ症の主な病原因子であると考えられている。本研究は、カンジダリシンと上皮細胞との結合を分子レベルおよび細胞レベルで明らかにすることを目的とし、さらに、この結合を阻害する分子を探索・同定し、口腔カンジダ症の予防法と早期治療法の開発につながる基礎的知見の獲得を目指すものである。
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| Outline of Annual Research Achievements |
カンジダリシンの電気的性質に着目し、C末端の３つのリシン残基の正電荷と相互作用するポリマー（負電荷をもつヘパリン、ポリアクリル酸）の存在が、カンジダリシンの上皮細胞への結合を抑制し、上皮細胞傷害活性を抑制し、またカンジダリシンによる上皮細胞活性化（細胞内シグナル伝達、IL-８産生）を抑制することを報告した（JOB, 65, 2023）。また、カンジダリシンによって生じる活性化の詳細を検討したところ、NFkBの子ファクターであるIkBzの誘導が生じること、さらにIkBzの発現はカンジダリシンの作用を受けた上皮細胞によるIL-6産生に必須ではないものの、促進的作用を持つことを報告した（JODU, 57, 2023）。
カンジダリシンのC末端に存在する3つのリシン残基は、双生イオンであるため存在する環境のpHによってその電気的性質を変化させる。そこで単球・マクロファージ系細胞であるTHP1細胞を用いて、培地のpHを変化させた時のカンジダリシンによって誘導されるインフラマソーム活性化を検討した。培地のpHが中性あるいは酸性である場合はカンジダリシンによってTHP1のインフラマソームの活性化（ガスダーミンDの活性化で評価）の誘導が確認されたが、培地のpHがアルカリ性ではインフラマソームの活性化が大きく低下した。これはアルカリ条件下ではリシン正電荷が減弱したことにより両親媒性の性質をもつカンジダリシンが疎水性の性質を強くしたために、細胞への吸着・膜傷害活性が低下したことが原因であると考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究で、ヘパリンやポリアクリル酸などの陰性荷電を持つ高分子が、カンジダリシンの上皮細胞傷害活性を抑制することを見出し報告した。また、カンジダリシンによる上皮細胞活性化の詳細を検討し、カンジダリシンによって発現が誘導されるIkBzがIL-6の分泌に関与することを報告した。現在、組織のpHがカンジダリシンによる細胞傷害及び活性化に及ぼす影響を検討しており、研究期間終了までにデータを収集できる見込みである。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在、組織のpHがカンジダリシンによる細胞傷害及び細胞活性化に及ぼす影響を検討している。培地のpHを変化させて反応性を検討しているが、さらにより生体に近い条件下での検討を行う。また、pHによるカンジダリシンの作用の変化に介入できかつ生体に適用できる薬剤の開発に向けた基礎的知見を得るための実験を進めていく予定である。
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