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Development and advanced utilization of unexplored culture environment for submerged culture with microorganisms via gas phase

Research Project

Project/Area Number 22K14544
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 27040:Biofunction and bioprocess engineering-related
Research InstitutionUniversity of Tsukuba

Principal Investigator

Takahashi Masato  筑波大学, 生命環境系, 助教 (60826965)

Project Period (FY) 2022-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Keywords微生物培養 / 液内振盪培養 / 振盪フラスコ培養 / ガス制御システム / 二酸化炭素換気能 / 酸素供給能 / 換気エンハンサー / モニタリングデバイス / 好気的液内培養 / 振盪フラスコ培養法 / ガス制御 / 微生物 / 微生物群集
Outline of Research at the Start

微生物を生物資源として利用するためには、有用な微生物を単離し培養することが重要である。未知の微生物資源を利活用するためには、『未培養の微生物』と『未生産の代謝産物』の両方にアクセスする必要がある。一方で、単離できる微生物は僅か1%に過ぎず、培養は限定的な従来のノウハウに依存している。申請者は、サンプリング操作を含めた振盪フラスコ培養中の意図せぬ影響を解析し、液内振盪培養中の培養器の気相部が培地と同様に重要な培養因子であることを明らかにしてきた。本研究では、利便性を維持したガス制御機構を考案し、上述の未知の微生物資源へのアクセスをおこなう。

Outline of Final Research Achievements

This study was challenged to "develop the unexplored culture environment via gas phase". In conventional shake-flasks, carbon dioxide (CO2) ventilation capacity was much smaller than oxygen (O2) supply capacity, induce the unintentional gas changes. The gas phase of shake-flasks during microbial cultivation used gaseous incubator were monitored. As a result, it was cleared that the flask gas phase was filled over gaseous CO2 more than the set point. The developed ventilation enhancer combined with the gas incubator including shaking table was able to be control the gas conditions according to the set point, while maintaining the components and convenience of the conventional shaking culture method. A plug system forced aeration for microbial culture of multiple shaken vessels suppresses volatilization, was developed.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

フラスコなどの培養器を用いた液内振盪培養は、採取した環境試料中の有用微生物の集積、微生物を用いた生産技術の開発や改善を図るうえで、簡便に培養スクリーニングができる重要なバイオ技術である。原則、培養器の換気能の向上や強制的な通気をしない限り、ガス制御できないことが明らかとなった(非意図的なガス変動は、純粋培養と集積培養の両方に影響を及ぼす)。開発した換気エンハンサーとガスインキュベータの併用や、培地の揮発を抑制できる液内振盪培養用の通気プラグシステムを用いることで、培養器の気相環境を再現よく簡便に制御できる。バイオプロセス開発上流や培養を介した微生物および機能性成分の探索への導入が期待できる。

Report

(3 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Research-status Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2024 2023 2022

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (5 results) (of which Invited: 1 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Aforced aeration systemformicrobialculture ofmultipleshaken vessels suppresses volatilization2024

    • Author(s)
      Takahashi Masato, Aoyagi Hideki
    • Journal Title

      Archives of Microbiology

      Volume: 206 Issue: 6

    • DOI

      10.1007/s00203-024-03960-2

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of a feed-forward control system for medium in shake-flask culture2023

    • Author(s)
      Takahashi Masato, Kato Takuya, Aoyagi Hideki
    • Journal Title

      Biochemical Engineering Journal

      Volume: 196 Pages: 108939-108939

    • DOI

      10.1016/j.bej.2023.108939

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Control of carbon dioxide concentration in headspace of multiple flasks using both non-electric bellows pump and shaking incubator2022

    • Author(s)
      Masato Takahashi, Hideki Aoyagi
    • Journal Title

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      Volume: 134 Issue: 3 Pages: 240-247

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2022.06.006

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 振盪フラスコによる微生物の液内培養法の特性・課題・展望 -非意図的な影響について-2022

    • Author(s)
      高橋 将人, 青柳 秀紀
    • Journal Title

      日本醸造協会誌

      Volume: 117 Pages: 736-742

    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 微生物の振盪培養に用いる培養器の換気能に着目したガス制御システムの開発2023

    • Author(s)
      高橋 将人, 青柳 秀紀
    • Organizer
      第75回日本生物工学会(一般講演)
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Presentation] 気相環境に着目した新規培養法による微生物ダークマター資源の探索2023

    • Author(s)
      高橋 将人
    • Organizer
      日本生物工学会 研究部会シンポジウム「未培養微生物(微生物ダークマター)資源の新展開」
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] ガス環境に着目したラボスケールの液内振盪培養法の深化と新展開2022

    • Author(s)
      高橋 将人
    • Organizer
      第74回日本生物工学会(第1回生物工学若手賞受賞講演)
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 振盪フラスコ培養の換気能を増大させる新規デバイスの開発2022

    • Author(s)
      高橋 将人, 青柳 秀紀
    • Organizer
      第74回日本生物工学会(一般講演)
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 微生物培養におけるフラスコスケールの液滴型流加システムの開発2022

    • Author(s)
      加藤 拓也, 高橋 将人, 青柳 秀紀
    • Organizer
      第74回日本生物工学会(一般講演)
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Book] 「工作ニュース」液内振盪培養中における培養器の気相ガス制御にむけて2024

    • Author(s)
      高橋 将人
    • Total Pages
      5
    • Publisher
      筑波大学研究基盤総合センター工作部門
    • Related Report
      2023 Annual Research Report
  • [Book] 「未培養微生物研究の最新動向」第Ⅱ編1章 従来の微生物培養法の特性:問題点と新たな培養法の提案2023

    • Author(s)
      青柳 秀紀, 高橋 将人, 髙野 力, 小林 和輝, 斉藤 諒, 長谷川 智弘, 原田 玲奈
    • Total Pages
      11
    • Publisher
      シーエムシー出版
    • Related Report
      2023 Annual Research Report

URL: 

Published: 2022-04-19   Modified: 2025-01-30  

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