ブリノカルジア症のワクチン開発に向けた細胞性免疫を誘導する感染防御抗原の探索

Research Project

Project/Area Number	22K14952
Research Category	Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Basic Section 40040:Aquatic life science-related
Research Institution	Fisheries Research and Education Agency
Principal Investigator	松浦雄太国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産技術研究所(南勢), 任期付研究員 (40823894)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000) Fiscal Year 2022: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords	ノカルジア / 細胞性免疫 / 感染防御抗原 / 細胞内寄生細菌
Outline of Research at the Start	ブリのノカルジア症は国内で発生する魚病被害額の20%(例年20億円程度)を占めるほどの甚大な経済損失をもたらしており、ワクチンの開発が求められている。開発が容易で現在市販化されている水産用ワクチンの大半を占める不活化ワクチンではノカルジア症を防除できず、これまでと異なる開発戦略が必要である。本研究では、ノカルジア菌に対する感染防御機構として重要な細胞性免疫を測定する技術を応用し、ノカルジア菌の感染防御抗原の特定を目指す。また、特定した抗原の情報を利用しDNAワクチンやmRNAワクチンなど次世代型ワクチンの開発を行い、感染症被害の軽減を目指す。
Outline of Annual Research Achievements	ブリのノカルジア症は国内で発生する魚病被害額の20%(例年20億円程度)を占めるほどの甚大な経済損失をもたらしており、ワクチンの開発が求められている。しかし、開発が容易で現在市販化されている水産用ワクチンの大半を占める不活化ワクチンではノカルジア症を防除できず、DNAワクチンやmRNAワクチンなど次世代型ワクチンが注目されている。本研究では、ノカルジア菌に対する感染防御機構として重要な細胞性免疫を測定する技術を応用し、ワクチン候補抗原として使用可能なノカルジア菌の感染防御抗原の特定を試みた。ノカルジア菌より抽出した菌体タンパク質を各種クロマトグラフィーにより精製した。また、ノカルジア菌感染に対して感染防御能を有する感染耐過魚を作製し、本個体より白血球を分離した（耐過魚由来白血球）。さらに、耐過魚由来白血球に精製した菌体抗原を添加・培養し、細胞性免疫の指標となるインターフェロンγ（IFNγ）産生量を定量した。その結果、分子量約20,000のタンパク質を含む精製画分に高いIFNγ産生誘導能が確認された。現在、本画分に含まれるタンパク質の同定作業を実施中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 本研究により、細胞性免疫産生誘導能を有するノカルジア菌体由来抗原が分子量約20,000のタンパク質を含む精製画分に含まれることが明らかとなった。よって、2022年度の研究実施計画において達成目標としていた、「細胞性免疫を誘導する抗原の精製実験およびその同定」についてはおおむね達成しており、研究が順調に進展していると考える。
Strategy for Future Research Activity	2023年度以降は、2022年度の研究により見出した細胞性免疫を誘導する抗原が感染防御抗原であることを証明する実験を実施する。また、DNAワクチンやmRNAワクチン等感染防御抗原を利用した次世代型ワクチンを試作し、その有効性評価を実施する予定である。