| Project/Area Number |
22K15250
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Review Section |
Basic Section 47010:Pharmaceutical chemistry and drug development sciences-related
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
|
|---|
| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2024-03-31
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
|
| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
|
|---|
| Keywords | ペプチド / 抗体 / 細胞内送達 / 細胞質 / 膜傷害性ペプチド / コンジュゲート / エンドサイトーシス / エンドソーム脱出 / 細胞内導入ペプチド / 高分子送達 / タンパク質 / 細胞内取込み / in vivo / 細胞質送達ペプチド / ターゲティング |
|---|
| Outline of Research at the Start |
抗体は、高難度標的を制御可能な分子として着目されているが、細胞膜透過性に乏しく、細胞内を標的にできないことから、in vivoにも応用可能な細胞質送達技術の確立が望まれている。当研究室では、抗体と混合することで、抗体の効率的な細胞質送達を可能にする細胞質送達ペプチドを開発している。本研究では、細胞質送達ペプチドのin vivo展開に向けた分子設計によって、in vivoにおける細胞内分子の機能制御に挑戦する。
|
| Outline of Final Research Achievements |
In this study, we developed E3MPH16, which has a wide safety margin and highly efficient cytosolic delivery derived from mastoparan X, and showed that anti-Ras antibody delivered by E3MPH16 into HT1080 cells inhibited their growth. Furthermore, topical administration of NLS-EGFP and E3MPH16 to tumor-bearing mice showed that NLS-EGFP could be delivered to the cytosol in some cells. We also examined the preparation of conjugates of L17ER4, an intracellular delivery peptide, with antibodies. We showed that the conjugates could be prepared by the enzyme-chemical method using sortase, and the antibodies could be delivered to the cytosol without aggregation. The application of the conjugation method to various peptides will lead to more efficient cytosolic delivery of antibodies and will be a fundamental technology in vivo delivery, and it is expected to lead to practical drug discovery research efforts in the future.
|
| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
今回開発したE3MPH16は低毒性かつ高効率で高分子を細胞質に送達可能なペプチドであることから、機能性高分子の細胞質送達に有用であると考えられる。また、in vivoでも送達可能であったことから、今後、抗体の細胞質送達による細胞機能制御への展開が期待される。また、L17E４と抗体のコンジュゲート設計を達成したことから、このコンジュゲーション方法を様々なペプチドに応用することで、より効率的な抗体の細胞質送達につながるとともに、in vivoでのデリバリーにおける基盤技術になると考えられ、今後、創薬研究への実践的取り組みにつながると期待される。
|
