卵巣癌の新規治療標的 TIE-1 に対する PROTAC を用いた阻害剤の開発

Research Project

Project/Area Number	22K15536
Research Category	Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Allocation Type	Multi-year Fund
Review Section	Basic Section 50010:Tumor biology-related
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	石橋ますみ東北大学, 大学病院, 助教 (20821383)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help	¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000) Fiscal Year 2024: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000) Fiscal Year 2023: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000) Fiscal Year 2022: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Keywords	TIE-1 / PROTAC
Outline of Research at the Start	卵巣癌は婦人科領域では最も予後の悪い疾患であり、その主な原因が抗癌剤耐性である。チロシンキナーゼ受容体型タンパク質TIE-1は血管内皮細胞に発現し血管新生・安定性への関与が報告されていたが、癌細胞における役割は明らかでなかった。申請者はこれまでに TIE-1 が卵巣癌の予後不良因子であること、PI3K/Aktシグナルを介した細胞増殖に関与すること、卵巣癌治療に用いられる白金製剤への耐性に関与することを明らかにした。しかし、TIE-1を標的とした創薬開発は未開拓である。そこで、本研究ではPROTAC技術を用いて、 TIE-1を阻害しその卵巣癌治療効果を検証する。
Outline of Annual Research Achievements	卵巣癌の手術検体からTissue microarray を作製し、TIE-1の発現を組織免疫化学染色で確認し、組織型別のTIE-1発現、また患者予後とTIE-1発現との関連についてさらに検体数を増やして検討した。これまでの研究成果は２０２２年の第６４回婦人科腫瘍学会学術講演会や、第７４回日本産科婦人科学会学術講演会で発表した。またTIE-1のPROTAC(PROteolysis-TArgeting Chimeras)のin silicoでの設計を行った。現在は設計したPROTACのライブラリーを作成中である。ライブラリーが完成したのち、 TIE-1 PROTAC をそれぞれ TIE-1 高発現卵巣癌細胞株 TOV-112D に暴露したのち、細胞から蛋白を回収して TIE-1 の定量を行い、最も TIE-1 の蛋白量を減少させた TIE-1 PROTAC を hit TIE-1 PROTAC とする。hit TIE-1 PROTACを同定した後に、複数の卵巣癌細胞株を用い、TIE-1 PROTAC 曝露後の細胞生存率を測定し、卵巣癌治療に用いられる抗がん剤との細胞増殖抑制効果と比較する。また、免疫不全マウスを用いて生体レベルでのTIE-1 PROTAC単独および抗がん剤と併用での抗腫瘍効果を確認する予定である。現在、TIE-1と悪性腫瘍をテーマにレビュー論文を執筆しており、投稿準備中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason コロナウイルス感染拡大に伴い、使用する薬剤の入手に時間を要した。
Strategy for Future Research Activity	PROTAC試薬が完成したのちに、in vitroでTIE-1抑制効果の最も高いPROTACを選択し、in vitro および in vivo で腫瘍増殖抑制効果を検討する予定である。