遺伝子発現制御法を用いた多発性硬化症の成因解明と治療探索研究
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22K15669
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 52010:General internal medicine-related
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
中里 祐毅 宮崎大学, 医学部, 助教 (90885972)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
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| Keywords | 神経免疫 / 多発性硬化症 / EAE / アナモレリン / グレリン / 実験的自己免疫性脳脊髄炎 / ケモジェネティックス |
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| Outline of Research at the Start |
多発性硬化症は、髄鞘構成成分に対する自己反応性T細胞が中枢神経内へ浸潤し、炎症を誘導することで引き起こされる中枢神経系の自己免疫疾患である。多発性硬化症における神経細胞と免疫細胞の相互作用はこれまで十分に解明されていない。本研究ではケモジェネティクスを用い、神経細胞特異的にその活動性を制御することで、神経細胞とリンパ球をはじめとした免疫機構の相互作用を、病態形成期および回復期において検討する。
多発性硬化症モデル動物に対して治療有効性が示されている生理活性ペプチド グレリンの経口低分子アゴニストであるアナモレリンが2021年に発売された。モデルマウスにおけるアナモレリンの治療効果を検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまで多発性硬化症モデル(Experimental autoimmune encephalomyelitis)マウスに対する生理活性ペプチド グレリンが神経障害に対して抑制的に作用することが明らかにされている(Theil MM et al. J Immunol 2009)。我々は、EAEに対するグレリン受容体選択的作動薬であるアナモレリンの治療効果およびその作用メカニズムについて検討している。
EAEマウス（雄）に対して誘導同日から14日間連日、アナモレリンを腹腔内投与すると、運動障害は改善すること、組織学的に脱髄が軽減すること、CD4、CD8陽性細胞、B細胞の脊髄内浸潤が減少することをこれまでに明らかにしてきた。またアナモレリン投与により病変部脊髄でのTnfa-mRNAの発現が減少することも見出した。またin vitro実験系で活性化CD4陽性細胞にアナモレリンを直接添加するとTnfa-, Ifng-mRNAの発現が減少することを明らかにした。
本年度はフローサイトメトリーを用い細胞内サイトカイン染色を行い、脊髄およびリンパ節でTNFa陽性CD4陽性細胞がアナモレリン投与により減少することを明らかにした。また脊髄内Iba-1陽性細胞数も同治療で減少した。アナモレリンのEAE急性期の治療効果を検討するため、発症期である誘導後14日から7日間同薬剤を投与したところアナモレリン投与群で運動障害スコアは低値を示したが、統計学的有意差はみられなかった。これまでの行動評価は雄マウスのみを用いていたが、雌マウスにEAEを誘導し、アナモレリンを連日投与したところ、雄マウスと同様に運動機能障害は軽減した。以上よりEAEにおけるアナモレリンの抗炎症作用がTNFaを機転とすること、運動障害出現後より早期の投与でその効果が見込まれることを示した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
EAEにおけるアナモレリンの治療効果についてTNFaに着目し解析を進めた。またリンパ球以外にミクログリアの解析も行った。EAEにおける早期のアナモレリン投与による効果に加え、急性期の治療的効果についても検証した。また雄のみならず雌マウスについても同薬剤の治療効果の検討を実施できた。
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| Strategy for Future Research Activity |
EAEに対するアナモレリンの治療効果については論文化を進める。EAEにおけるdesigner receptor exclusively activated by designer drugs(DREADD)による神経細胞の機能制御実験について作成したDREADD発現AAVを用い、実験を進める。
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Report
(2 results)
Research Products
(3 results)
