新規アッセイ法による肺炎球菌ワクチン接種幼児の唾液と血清における抗体レベルの比較

• Project/Area Number: 22K15924
• Research Category: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: ドバデル ビム 長崎大学, 熱帯医学研究所, 准教授 (80761113)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000); Fiscal Year 2024: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2023: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000); Fiscal Year 2022: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
• Keywords: 肺炎球菌ワクチン / マルチプレックス免疫アッセイ / ワクチン血清型 / 抗体価 / Luminex

Outline of Research at the Start

肺炎球菌ワクチンの効果を調査するために、酵素結合免疫吸着法(ELISA)を用いた抗体測定が行われるが、この方法は非効率的で多くの血清検体を必要とし、費用も高額である。本研究ではこれらの点においていずれも優れているLuminexを用いた、24種のワクチン血清型に対する抗体価を一度で測定可能なアッセイ系を開発し、その有用性を検証する。
次にこのアッセイを用いて、ワクチンを接種した小児や高齢者の唾液を検体とした抗体測定の可能性を明らかにする。次世代肺炎球菌ワクチンの開発が盛んになる中で求められる、小児や高齢者におけるワクチン効果を効率的に評価するための有望なツールの開発を目指す。

Outline of Annual Research Achievements

研究成果についての具体的内容：
本研究の目的の１つ目に挙げた「全ての肺炎球菌ワクチン血清型に対する抗体測定を目的とした新規24項目Luminexアッセイの開発と検証」に関して、開発を2022年夏までに完了した。検証についても、2022年末までに、感度・特異度・再現性についての評価を終了した。従来法であるELISAとの比較によりいずれのワクチン血清型も非劣性を示している。２つ目に挙げた「唾液を用いたワクチン血清型に対する抗体価測定の可能性の検証」について、最初の段階である倫理審査については長崎大学内倫理委員会からの承認が４月に得られ、ネパール健康研究会議（倫理委員会）への承認申請の準備中である。
研究成果の意義：
これまでの成果として、新規アッセイ系における感度・特異度・再現性のデータを収集した。これは様々な濃度の血清に含まれる抗体量（抗体濃度）を正確に検出できることを評価するものであり、採取する検体量が少なく、希釈が必要な場合であっても、血清中抗体濃度測定は可能であることを証明している。また、特異度に関しては、非特異的結合が血清型間でどの程度起こるかを検証するものであり、これも従来法に劣らないデータとなった。再現性も高く、実用性が高いアッセイであることが見込まれる。
研究成果の重要性：
従来法は多く検体、時間、費用を要するが、新規アッセイ系による大幅に効率が良くなる。今後、新規に承認されたワクチンも含め、ワクチンの効果を量的に評価する際の一助となる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

新規アッセイの開発・検証は終了した。現在は実際の患者検体を用いた評価の初動段階であり、倫理委員会からの承認が日本側では得られている。計画書に示したタイムラインにほぼ沿った状況と言える。ネパールでの検体収集についても現地視察は終えており、倫理申請の準備に入っている。

Strategy for Future Research Activity

今後、ネパール健康研究会議 (NHRC) から倫理承認を得ることとなる。承認時期については現在のところ未定ではあるが、ネパールの現地医師と定期的なミーティングをもち、承認後に速やかに検体収集や疫学データ収集ができるように準備を進めている。具体的には６月以降、疫学データ収集ツールの準備、検体の収集・保存・管理の手順書の作成、現地の研究補助員の選定・トレーニングを行う予定である。