| Project/Area Number |
22K16144
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 53020:Cardiology-related
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
三浦 俊輔 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (90814442)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,510,000 (Direct Cost: ¥2,700,000、Indirect Cost: ¥810,000)
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| Keywords | ヘルパーT細胞 / 圧負荷心不全 / ヘキソキナーゼ / ミトコンドリア |
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| Outline of Research at the Start |
圧負荷心不全の進行においてTh1細胞やTh17細胞等の炎症性サイトカインを産生するヘルパーT細胞を介した反応が関与していることが明らかにされている。Hexokinase 1(HK1)はミトコンドリア外膜に存在する電位依存性陰イオンチャネル(VDAC)に結合することにより、ミトコンドリアの代謝を調整することが知られており、HK1がミトコンドリアから脱結合したヘルパーT細胞においては、Th1細胞からのInterferon-γ(IFN-γ)産生が低下する等の抗炎症作用が確認できる。本研究は、T細胞ミトコンドリアからのHK1の脱結合が抗炎症作用を介して圧負荷心不全の進展を抑制するという仮説を検証する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、T細胞のHexokinase1 (HK1)をミトコンドリアから脱結合させることが抗炎症作用を介して圧負荷心不全の進展を抑制するという仮説を検証するものである。
ノコダゾールの投与は、HK1のミトコンドリアからの脱結合を起こし、Interferon-γ産生を抑制することは確認した。
大動脈縮窄圧負荷（TAC）による心不全モデルのマウスを用いて、T細胞のHK1解離が心不全抑制つながるかを明らかにするための実験を継続中である。T細胞特異的にHK1のミトコンドリア結合ドメインを欠損させたマウス（T細胞特異的HK1 exon1 deletion マウス）を作成することに難渋している。そのため、野生型マウスから単離したT細胞にレンチウィルスを用いてvdac1-based peptideを過剰発現させることで、HK1がミトコンドリアに結合しないT細胞を作成し、TACを施行されたRag1ノックアウトマウスに移植し、心機能評価を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
T細胞特異的にHK1のミトコンドリア結合ドメインを欠損させたマウス（T細胞特異的HK1 exon1 deletion マウス）を作成することに難渋している。
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| Strategy for Future Research Activity |
T細胞特異的HK1 exon1 deletionマウスの作成が難しい場合は、野生型マウスから単離したCD4T細胞のHK1を薬物的に脱結合させ、TACを施行したRag1 KOマウスに移植し、心機能を評価しようと考えている。そのために、まず圧負荷心不全におけるCD4T細胞の増加が心筋のどの抗原に対して増加するのかを明らかにし、抗原特異的なT細胞を作成する予定である。更にレンチウィルスを用いて、HK1のVDACへの結合部位を含むペプチドを過剰発現させ、HK1がVDAC1に結合できにくい抗原特異的T細胞を作成し、HK1 exon1 deletionマウス由来T細胞の代わりに使用しようと考えている。
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