急性移植片対宿主病の重篤化抑制を目的としたバクテリオファージ療法の開発
| Project/Area Number |
22K16329
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 54010:Hematology and medical oncology-related
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| Research Institution | Osaka Metropolitan University |
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Principal Investigator |
藤本 康介 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (30802805)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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| Keywords | 腸内細菌 / バクテリオファージ / 急性移植片対宿主病 / ファージ療法 / 急性移植片対宿主病（GVHD） / dysbiosis |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では、同種移植患者糞便を用いたE. faecalisの単離、E. faecalis特異的な溶菌酵素の探索およびその溶菌活性の解析、GVHDモデルマウスを用いた溶菌酵素の効果の評価を行う。将来的なヒトへの臨床応用に繋がる基盤研究を行う。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、46症例の同種移植患者から経時的に集めた糞便検体の16SrRNA解析を行い、30症例においてEnterococcus属細菌の割合が顕著に増加していることを確認した。Enterococcus属細菌の割合が多い糞便検体からEnterococcus選択培地を用いて複数の菌株を単離し、PCR法を用いてEnterococcus faecalisとEnterococcus faeciumの菌株を選別した。得られた菌株の中にバンコマイシン耐性腸球菌は含まれていなかった。得られた菌株のショットガンシークエンスを行ったところ、E. faecalisにおいてバイオフィルム関連遺伝子を多く検出した。また、プロファージ配列を同定し、溶菌酵素配列を抽出した。得られた溶菌酵素配列を元に、溶菌酵素を人工合成し、in vitroでさまざまな腸内細菌に対する溶菌効果を検討した。E. faeciumやE. coliなど他の腸内細菌に対しては溶菌活性を持たず、E. faecalis特異的な溶菌酵素であることを明らかとした。さらに、無菌マウスにE. faecalisまたはE. faeciumを定着させ、in vivoにおいての溶菌活性を検討した。E. faecalisを定着させたシングルノトバイオートマウスでは顕著な溶菌活性を示したが、E. faeciumを定着させたシングルノトバイオートマウスでは溶菌効果を示さなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究課題では、メタゲノム解析技術を用いて、移植片対宿主病（GVHD: graft-versus-host disease）のリスクを高めるpathobiontに対する次世代ファージ療法の確立を目指すものである。目的達成のために、１）同種移植患者糞便を用いたE. faecalisの単離、２）E. faecalis特異的な溶菌酵素の探索およびその溶菌活性の解析、３）GVHDモデルマウスを用いた溶菌酵素の効果の評価を検討する。今年度までに、E. faecalis特異的な溶菌酵素の精製およびin vitroまたはin vivoでの活性評価まで進んでいる。以上から、実験計画通り概ね順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度に引き続き、GVHDモデルマウスでの溶菌酵素の効果を検討する。
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Report
(2 results)
Research Products
(20 results)
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[Journal Article] Prime-boost-type PspA3 +2 mucosal vaccine protects cynomolgus macaques from intratracheal challenge with pneumococci.2023
Author(s)
Yokota C, Fujimoto K, Yamakawa N, Kono M, Miyaoka D, Shimohigoshi M, Uematsu M, Watanabe M, Kamei Y, Sugimoto A, Kawasaki N, Yabuno T, Okamura T, Kuroda E, Hamaguchi S, Sato S, Hotomi M, Akeda Y, Ishii KJ, Yasutomi Y, Sunami K, Uematsu S.
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Journal Title
Inflammation and Regeneration
Volume: 43
Issue: 1
Pages: 55-55
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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