| Project/Area Number |
22K16849
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 56040:Obstetrics and gynecology-related
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
森田 晶人 群馬大学, 医学部附属病院, 助教 (30897905)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
Fiscal Year 2024: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2023: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
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| Keywords | エンドサイトーシス / 胚 / PKC / トランスフェリン / embryogenesis / endocytosis / mouse |
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| Outline of Research at the Start |
不妊治療における生殖補助医療は進歩しているが，その妊娠率，生児獲得率はいまだ満足のいくものではない．これに対し着床前診断として胚の染色体の分析を行う方法が開発されてきたが，有用性には議論の余地があり，その侵襲性から非侵襲的に胚の質を評価する方法が必要である．これまでにクラスリンというタンパク質を介したエンドサイトーシスと初期胚発生異常の関連を明らかにしたが，これは胚においてエンドサイトーシスが不妊・不育症と関連する可能性を示唆している．その詳細な分子メカニズムを解明することで，染色体不分離以外が原因の不妊・不育症患者に対しての生殖補助医療の成績向上，さらに初期流産の予防につながる可能性がある．
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| Outline of Annual Research Achievements |
1 :クラスリン依存性エンドサイトーシスのどこが障害されると初期胚発生異常が生じるのかを明らかにする
バフィロマイシンによって4細胞期、8細胞期で停止することが確認された。これは、エンドサイトーシス阻害剤によって2細胞期で停止するという結果よりも後期であり、エンドサイトーシスによる分解以外の要素の重要性が明らかとなった。
2 :細胞膜タンパク質のエンドサイトーシスに影響を与えるPKCサブタイプの同定
Sotrastaurine, Stauroporine, Ruboxistaurinなどの阻害剤を用いたアッセイを計画したが、予備実験にて、ほとんどの阻害剤が添加時に胚に着色や体積増加などの有害事象を起こすことが確認されたため、siRNAを用いた分子を直接減少させるアプローチに方向転換した。
3 :胚発生におけるエンドサイトーシス活性の視覚化
先に導入し検討した蛍光タグ付きトランスフェリンレセプターによるエンドサイトーシスの可視化について検討し、低侵襲性が確認でき、可視化も成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
細胞膜タンパク質のエンドサイトーシスに影響を与えるPKCサブタイプの同定をするにあたり，siRNAを用いた分子を直接減少させるアプローチに方向転換した．そのためsiRNAの導入や予備実験を行うため進行がやや遅れている．
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞膜タンパク質のエンドサイトーシスに影響を与える候補因子の同定するため，siRNAを用いた実験を行っていく．
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